Омарова аккенже бердихановна
Таблица 2 - Определение числа микробных клеток
жүктеу/скачать 8,57 Mb. Pdf көрінісі
|
Диссертация
| Таблица 2 - Определение числа микробных клеток
Разведение препарата 10 -7 10 -6 Количество посеянной суспензии Число колоний на одной чашке (1-ой) Число колоний на одной чашке (2-ой) 0,1 мл 45 56 0,1 мл 510 588 Расчет: среднее число колоний на чашке составляет 510+588/2 = 549 в разведении 10 -6 и 45+56 /2 = 55,5 в разведении 10 -7 Количество живых бактерий в 1 мл равно: 549 10 6 + 55 5 10 7 / 2 Ч 10 = 5520000000=5,5 млрд 6.5 Определение типичности роста колоний Колонии должны быть мелкие, выпуклые, белого цвета. 6.6 Определение бактерийной чистоты 6.6.1 Аппаратура и материалы по 6.4.1 6.6.2 Проведение испытания Определение бактерийной чистоты препарата проводят в соответствии с ГОСТ 28085 со следующими дополнениями: для определения бактерий группы кишечной палочки используют жидкую среду Кесслера. Содержимое каждого пакета растворяют стерильным физиологическим раствором из расчета 10 мл на одну дозу. Гранулы помещают в стерильные пробирки (флаконы) и добавляют стерильный физиологический раствор из расчета 10 мл на 1 г препарата. Из восстановленной взвеси готовят следующее разведение 1:10. Образцы препарата в разведении 10 -1 , в количестве 10 смі переносят в колбочки с 40-50 смі стерильной жидкой среды Кесслера. Посевы термостатируют при (38±1) єС в течение 18-24 часов. .Наличие бактерий группы кишечной палочки определяют по газообразованию. При отсутствии газообразования препарат считает не загрязненным бактериями группы кишечной палочки. По 1 смі образца разведений препарата 10 -2 и 10 -3 , переносят в чашки Петри с мясо- пептонным агаром, взяв по две чашки на каждое разведение. Стерильным шпателем тщательно растирают препарат по поверхности агара, оставляют на 2-3 часа для впитывания, переворачивают чашки вверх дном и помещают в термостат при температуре 37±1°С на 48±2 часа, затем подсчитывают количество выросших колоний. Пример расчета: Делают подсчет колоний в 2-х чашках Петри по разведениям. Если количество колоний в двух чашках составляет 10+20=30 в разведении 10 -1 и 1+2=3 в разведении 10 -2 , то число микробов в одной таблетке равно: (10+20) · 10 + (1+2) · 10 2 / 2 = 300 (сумма колоний в двух чашках умножается на число десятикратных разведений). Наличие колоний патогенной микрофлоры не допускается. Допускается наличие сапрофитной микрофлоры не более 300 колоний на 1 г. |