Орындаған: bg-04К (генетика 4-топ) Қабылдаған: Алтыбаева Н


Саузерн Блоттинг әдісі Нәтижесі



бет6/8
Дата03.12.2022
өлшемі0,99 Mb.
#161036
1   2   3   4   5   6   7   8
Байланысты:
Презентация биохим (копия) (копия) (копия) (копия) (копия) (копия)

Саузерн Блоттинг әдісі Нәтижесі

  • мембранада бекітілген ДНҚ спецификалық аймағымен үлгіні гибридизация лоу, үлгіде нуклеотид реттілігінің бар екенін көрсетеді. Кемшіліктері- рестрикция сайтын нүктелі мутацияларды анақтауға мүмкіндік бермейді.Көп жұмысты қажет ететін,қиын және қымбат әдіс. 

Саузерн –Блоттинг қолданалуы 

  • Рестрикциялық эндонуклеаздармен өңделген геномдық ДНҚ-мен жүргізілетін Саузерн блоттингті геномдағы ген көшірмелерінің санан анақтау үшін қолдануға болады. Рестриктазалармен кесілмеген жалғыз ДНҚ фрагментімен будандастырылатын сынама Саузерн блота бір жолақ береді, ал блотағы бірнеше жолақтар үлгінің бірнеше бірдей тізбектермен будандастырылғанан көрсетеді. Будандастыру жағдайларынаң өзгеруі (будандастыру жүргізілетін температуранаң жоғарылауы, тұз концентрациясынаң өзгеруі) жақын, бірақ бірдей емс тізбектермен будандастырудың ерекшелігі мен төмендеуіне әкеледі. 

Әдістің артылықшылықтары

  • Миллиондаған басқалардың арасында қызығушылық тудыратын бір немесе бірнеше фрагменттерді анықтау үшін сүзгі ДНҚ-ның қосарланған жұптасуына қолайлы жағдайларда қосымша таңбаланған бір тізбекті зондпен инкубацияланады. Байланбаған зондтар жуу арқылы жойылады, содан кейін байланыстырылған радиоактивті зондтары бар сүзгіге зонд бекітілген бір немесе бірнеше фрагменттердің орналасуын көрсететін фотопленка түседі. Осылайша, бастапқы гельде қызығушылық тудыратын әрбір адам ДНҚ фрагменті үшін пленкада ерекше радиоактивті жолақтарды көруге болады. Southern blotting-тің мутацияларды анықтау мүмкіндігі шектеулі, өйткені зондтар үлкен жоюлар немесе кірістірулер (кірістірулер) сияқты шектеу фрагментінің өлшеміне сезілетін әсер ететін ақауларды ғана анықтай алады. Бір немесе бірнеше негізді өзгертетін мутацияны анықтау мүмкін емес, егер ол шектеуші ферментті тану учаскесін жасамайынша немесе жоймайынша, соның нәтижесінде зонд анықтаған фрагмент өлшемі айтарлықтай өзгереді. Дегенмен, Southern blotting-тен басқа, гендегі бір немесе бірнеше негізгі жұптарға әсер ететін мутацияларды анықтаудың көптеген әдістері бар.


Достарыңызбен бөлісу:
1   2   3   4   5   6   7   8




©engime.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет