Реферат создание моноклональных антител (мка) привело к рево
жүктеу/скачать 1,33 Mb. Pdf көрінісі
|
monoklonalnye-antitela-ot-sozdaniya-do-klinicheskogo-primeneniya (1)
| моноклональные антитела
. Гибридомы сыграли и продолжают играть огромную роль в фундаментальной и прикладной иммунологии. МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА В ДИАГНОСТИКЕ МКА в силу своей высокой специфичности, стандарт- ности и технологичности оказались исключительно удобным и широко применяемым в настоящее время диагностическим средством. С их помощью определяют маркеры клеточных популяций (фенотипирование клеток крови, в частности лимфоцитов), опухолевые маркеры, гормоны, медиаторы, любые молекулы, обладающие антигенностью. Именно применение МКА в диагностике позволило значительно увеличить специфичность и чувствитель- ность тест-систем, основанных на реакции антиген- антитело. Так, даже в простой реакции агглютинации МКА (цоликлоны анти-А, анти-В и анти-D) применяют для определения агглютиногенов эритроцитов человека системы АВ0 и резуса (рис. 4). Они обладают высокой стандартностью и чувствительностью, характеризуются быстротой наступления и четкостью агглютинации. За счет своего качества реагенты обеспечивают достоверный результат даже при слабой экспрессии антигенов. Мето- дика определения группы крови с помощью цоликлонов позволяет отказаться от услуг доноров, кровь которых используют для приготовления изогемагглютинирующих сывороток. Главное, что цоликлоны применяются для типирования эритроцитов всех специфичностей, включая редкие [3, 4]. Необходимо также отметить, что иммуноферментный анализ, реакция иммунофлюоресценции, методы про- точной цитометрии, иммунохроматографии, радиоим- мунный анализ благодаря использованию МКА стали рутинными. Так, с помощью иммуноферментного анализа появилась возможность обнаруживать в крови и других биологических жидкостях опухолеспецифические или Рис. 3. Схема получения гибридом (Г.И. Абелев, 1998): А, В, С — многокомпонентная смесь антигенов, использован- ная для иммунизации (или сложные антигены со множеством антигенных детерминант); анти-А, анти-В, анти-С — монокло- нальные антитела соответственно к А-, В-, С-антигенам (или антигенным детерминантам); АОК — антителообразующие клетки селезенки; ГАТ — среда, содержащая гипоксантин, ами- ноптерин, тимидин; Пл — клетки плазмоцитомы, не растущие в селективной ГАТ-среде; ПЭГ — полиэтиленгликоль. Fig. 3. Diagram of obtaining hybridomas (GI Abelev, 1998): А, В, С — a multicomponent mixture of antigens used for immuniza- tion (or complex antigens with numerous epitopes); anti-A, anti-B, and anti-C — monoclonal antibodies against A-, B-, and C-antigens (or epitopes), respectively; АОК — antibody-forming splenic cells; ГАТ — hypoxanthine-aminopterin-thymidine medium; Пл — plas- macytoma cells which do not grow in the selective HAT-medium; ПЭГ — polyethylene glycol. Повторное клонирование и отбор анти-А-продуцентов Клонирование и отбор нужных продуцентов (анти-А) Гибридома, продуцирующая анти-А (хранение при –70˚С, размножение в культуре или in vivo ) АОК × Пл Гибридомы (анти-А, анти-В, анти-С, ...) Смесь антигенов Клетки плазмоцитомы (Пл) Культура плазмоцитомы Клетки селезенки (АОК) слияние +ПЭГ АОК АОК × АОК АОК × Пл Пл × Пл Пл АОК АОК × АОК АОК × Пл Пл × Пл Пл A, B, C ... Селективная ГАТ-среда 241 Моноклональные антитела www.medprint.ru опухолеассоциированные маркеры при злокачественных новообразованиях. Исследование иммунофенотипа клеток методом проточной цитометрии способствовало жүктеу/скачать 1,33 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|