Культурально-биохимические свойства. Строгий анаэроб. Хорошо растет на среде Китта-Тароцци (равномерное помутнение). На глюкозно-кровяном агаре формирует колонии сочные, крупные серого цвета с неровными краями, с небольшой зоной гемолиза. Нередко наблюдается появление дочерних колоний.
С. novyi неоднороден по антигенной структуре: различают его разновидности А В, С, D. Первые три разновидности характеризуются ползучим ростом; D растет в виде мелких прозрачных колоний; тип А - ферментирует глицерин; типы В и D проявляют β-гемолиз на кровяном агаре. Типы А и В — продуцируют α-некротизирующий токсин, который является капиллярным ядом, нарушающим проницаемость стенок сосудов. Следствием действия этого токсина при подкожном введении его кроликам развивается отек тестообразной консистенции. Серовар D (С. haemolyticum) вызывает инфекционную гемоглобинурию у крупного рогатого скота. Строгий анаэроб. Палочковидной формы, палочки крупные (более 6 мкм). Подвижный, образует спору (субтерминально). Окрашивается грамположительно. На плотной среде растет в виде колоний с ровными краями. В жидкой среде растет слабо, образуя хлопьевидный осадок. Ферментирует глюкозу. Молоко свертывает медленно. Слабо разжижает желатину. На средах с печенью и пептоном образует сероводород и индол.