Сандық цитохимия әдістері
Дәріс. Цито және гистохимияда өңдеуіштерді пайдалану
жүктеу/скачать 68,84 Kb.
|
Дәріс 1-15 Сандық цитохимия әдістері
- Бұл бет үшін навигация:
- Нуклейн қышқылдары
| 3 Дәріс. Цито және гистохимияда өңдеуіштерді пайдалану
Ақуыздар Ақуыздардың қалпына келуін реттеу негізінен мұздату–құрғату өңдеу әдістерінде жақсы өтеді.Ақуыздар бұл жағдайда біршама денатурацияланады. Ақуыздардың қалпына келу үшін химиялық өңдеуіштердің ішінде көбінесе этанол қоспасы жарамды, себебі олар активті ақуыз топтарымен аз әсерлеседі. Формальдегидтің маңыздылығын зерттеу қиындау, біресе оның ақуыздармен реакциясы жақсы зерттелген; сол сияқты тағы да бұл реакциялар көңіл аударарлық болып саналады. Құрамында пикринді қышқылы немесе ауыр металдары бар өңдегіш қоспалар (мысалы, Ценкера, Буэна, Суза) ақуыздардың гистохимиясында қолданылуға болады. Тіршілік циклыың сіңірілуіне сәйкес келетін гликогеннің адекватты өңделуі өте қиындатылған. Бұл жағдай гликогеннің әр түрлі түрлерінің тез ерігіштігімен түсіндіріледі. Әдеттегі гистологиялық өңдеу кезінде кесіндіде жоғары молекулалы гликогеннің үлкен молекулалары ғана сақталады, ал кіші деңгейдегі гликогендер полимеризациясында тез жуылып кетеді. Гликогеннің жоғалып кетуін және оның байланысу артефактыларынан қашу үшін пробаның алдын ала өңдеуішін дұрыс таңдау қажет. Нуклейн қышқылдары Нуклейн қышқылдары түрлі полимерлі пішінде (формада) болады. Өңделетін заттар полимеризация деңгейіндегідей, химиялық реакцияларға түсу кезінде өзгерістер тудырады.Формальдегидті пайдалануға болмайды, себебі ол реакцияға түсетін топтарды блоктайды, (блокирует) осылайша нуклейн қышқылдарының бояуларын нашарлатады. Құрылымның жақсы сақталуын қамтамасыз ететін этанол-уксус қышқылы және Карнуа тәрізді қыщқыл өңдегіш қоспалар болып табылады . Содан басқа олар, ақуыздар мен нуклейн қышылдарының байланысын біртіндеп жояды және осылайша негізгі бояғыштардың жақсы боялуымен реакцияға түсетін қышқылдардың санын көбейтеді. Бірақ қышқыл қоспасындағы өңдеу ұзақтығы біртіндеп РНҚ-ны, содан соң ДНҚ-ның шеттетілуіне әкеледі. Көбінесе, көлемі 2-3 мм- ден тұратын Карнуа өңдеуішіндегі 2 сағаттағы 20С–та өңделу әдісі қолданылады. жүктеу/скачать 68,84 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|