Транскрипция – синтез рнк по матрице

жүктеу/скачать 15,26 Kb. Дата 29.01.2018 өлшемі 15,26 Kb. #36084

Бұл бет үшін навигация:

• ТРАНСКРИПЦИЯ
• РНК транскрибируется комплементарно и
• Бактериальная РНК-полимераза
• Цистрон – ген, кодирующий один полипептид или одну
• Репрессор
• Бактериальный промотор
• Транскрипционная единица эукариот
• Структура эукариотического промотора

Транскрипция – синтез РНК по матрице ДНК Все типы РНК транскрибируются с ДНК Рибонклеозидтрифосфаты – субстраты для синтеза РНК ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ А Г Ц У Нуклеозидтрифосфаты Принципы транскрипции 2. Комплементарность 3. Антипараллельность 5. Асимметричность 4. Униполярность 1. Матричный принцип ТРАНСКРИПЦИЯ   5΄ CGATGCAT 3΄ Нематричная цепь, кодирующая или смысловая   ДНК   3΄ GCTACGTA 5΄ Матричная цепь, некодирующая или несмысловая     m PHK 5΄CGAUGCAU 3΄ РНК транскрибируется комплементарно и антипараллельно с одной из цепей ДНК Эксперимент, доказывающий, что транскрипция идет с одной цепи ДНК Разные гены могут транскрибироваться с одной и другой цепи ДНК Транскрипция у прокариот РНК-полимераза E.coli Белок с четвертичной структурой Holo-фермент (полный) состоит из 5 субъединиц –ααββγ. Без γ – это core-фермент. γ узнает расплавленные области промотора. Holo-фермент связывается с промотором и начинает транскрипцию после этого γ уходит и далее элонгацию осуществляет core-фермент В β субъединице находятся 2 каталитических центра, один отвечает за инициацию, а другой за элонгацию. Один работает в Holo-ферменте а другой – в core-ферменте Бактериальная РНК-полимераза Единица транскрипции у прокариот Оперон Промотор Оператор Цистрон 1 Терминатор Цистрон n Цистрон 1 Цистрон – ген, кодирующий один полипептид или одну молекулу РНК ДНК 3' 5' П О Т 3' 5' Промотор Начало транскрипции -10 -35 16-19 пар нуклеотидов РНК-полимераза ТТГАЦА ТАТААТ П О Т 3' 5' Репрессор Оператор Терминация П О Т 3' 5' не гни папин ген Теория оперона Ф. Жакоб и Ж. Мано 1961 год Оперон – это группа генов, функции которых тесно связаны в метаболизме. Оперон весь либо активен, либо не активен. Если оперон активен, с него транскрибируется полицистронная мРНК, служащая матрицей для синтеза всех белков оперона. Промотор – РНК-полимераза узнает в промоторе два АТ-богатых расплавленных участка , центры их -10 и -35п. н., а между ними 16-19 п. н. (если меньше или больше, РНК-полимераза не узнает промотор) Этапы транскрипции Узнавание и прочное связывание РНК-полимеразы с промоторомЕсли оператор свободен, то в β субъединице оказывается первый нуклеотид оперона и при этом плавится один виток двойной спирали ДНК – 10 п.н.Образуется транскр глазок 3. Инициация – образование фосфодиэфирной связи между 1 и 2 нуклеотидом. Первый всегда пурин трифосфат. σ покидает фермент 4. Элонгация – наращивание цепи РНК Core фермент покрывает 40 п. н. при этом плавления спирали не происходит , но зато В-форма ДНК превращается в А-форму с пустотой внутри 0,5 нм, что облегчает транскрипцию. Водородные связи разрываются на участке не более 6 п. н. 5. Терминация Lac-оперон Если в среде глюкозу заменить лактозой, то через некоторое время E. coli начинают синтезировать 3 фермента, обеспечивающих метаболизм лактозы. В отсутствие лактозы репрессор ( аконитаза) связан с оператором, перекрывающим промотор, и транскрипция не идет. При появлении лактозы, она связывается с репрессором, оператор освобождается и начинается транскрипция оперона Триптофановый и гистидиновый опероны В присутствии солей аммония как источника азота E. coli синтезирует все АМК. При добавлении в среду Три или Гис перестает синтезировать именно эти АМК. Это связано со структурой корепрессора, который не имеет сродства к оператору, но приобретает его после присоединения АМК и тогда он присоединяется к оператору и запрещает транскрипцию Оперон – единица транскрипции у прокариот, с него считывается 1 молекула РНК Промотор – в начале оперона, в конце – терминатор, а между ними Цистроны-последовательность ДНК, кодирующая 1полипептид или 2 РНК Промотор – площадка для посадки РНК-полимеразы Терминатор- сигнал к окончанию Транскрипции Оператор- регуляторный участок оперона. С ним связывается белок-репрессор и останавливает транскрипцию Готовность к транскрипции Ремоделирование нуклеосом strip, split,flip? Деконденсация доменов Гиперацетилирование гистонов и появление чувствительности к ДНК-азе I Уменьшение или распад нуклеосом Превращение нуклеосом в гексасомы Территория хромосомы – неактивные гены внутри, а активные по периферии Бактериальный промотор Мотивы бактериальных промоторов Инициация ~ ~ А Г Ф Ф Ф У Ф Ф Ф ~ ~ Г Элонгация – последовательное наращивание цепи РНК. При этом необходим разрыв водородных связей. В это время работает core-фермент. Он сначала переводит В форму в А, в которой есть внутренняя пустота, облегчающая элонгацию, разрыв водородных связей происходит на очень небольшом участке – 6 п.н. Терминация- в терминаторе имеются Г-Ц богатые участки – палиндромы.Дойдя до палиндрома, РНК-полимераза не останавливается, а считывает его. После этого копия палиндрома в РНК складывается в шпильку а фермент сваливается с ДНК Транскрипционная единица эукариот Инициация транскрипции у эукариот Разнообразие РНК-полимераз в эукариотических клетках Структура эукариотического промотора Терминация транскрипции Грибы, Amanita, содержащие яд Аманитин, оста- навливающий Транскрипцию РНК-полимераза II –очень чувствительна, III – менее, I - нечувствительна жүктеу/скачать 15,26 Kb. Достарыңызбен бөлісу: