Материалы и методы. Для изучения влияния абамекура на общую репродуктивную функцию белых крыс использовали метод двух поколений [1, 2].
В эксперименте использовали 20 крыс-самок и 10 крыс-самцов линии Вистар, достигших половой зрелости (поколение F0). Исходная масса крыс основного поколения самцов – 180-190 г, самок 155-160 г. Начиная с первого дня беременности, крысам ежедневно через рот с помощью желудочного зонда вводили абамекур: 1-ой группе в дозе 10 мг/кг/день; 2-ой группе 2 мг/кг/день; 3-й группе (контроль) – дистиллированную воду в соответствующих объемах. Введение абамекура самкам F0 продолжали до окончания вскармливания поколения F1а. После отъема и начала самостоятельного приема корма препарат вводили самцам и самкам F1а в указанных дозах, соответсвенно, номеру группы. После достижения половой зрелости самцов и самок F1а спаривали между собой и отбирали беременных самок. Препарат продолжали вводить беременным самкам и самцам в соответсвующих дозах. С целью оценки влияния абамекура на пренатальное развитие потомства F2а 5 самок убивали декапитацией на 20-й день беременности. Плоды извлекали из рогов матки и обследовали визуально. Учитывали количество желтых тел, резорбированных и мертвых эмбрионов. Вычисляли общую, доимплантационную и постимплантационную эмбриональную смертность. Замеряли краниокаудальный размер плода и массу плода. Проводили исследование сагитальных срезов по методу Вильсона в модификации Дыбана А. П. [3, 4]. Часть беременных самок (по 5 в каждой группе) доводили до родов.
После рождения изучали следующие показатели: количество крысят, родившихся у одной самки, массу потомства еженедельно, некоторые показатели физиологического развития: сроки отлипания ушных раковин, открытие глаз, покрытие шерстью, прорезывание резцов, выживаемость потомства на 30-й день.
Для тестирования эмбриотоксического и тератогенного действий абамекура использовали 250 самок и 50 самцов крыс массой 200-220 г. В каждую группу отбирали по 6-8 беременных животных. Препарат вводили беременным самкам однократно, перорально, с 1 по 15-й дни эмбриогенеза в дозе в дозе 2 мг/кг. Беременных самок убивали на 20 день беременности путем декапитации и исследовали показатели согласно методическим рекомендациям [3, 5].
Мутагенные свойства абамекура изучали в тесте Эймса [6] и методом индукции доминантных летальных мутаций [7, 8]. В опыте использовали 10 крыс-самцов массой 250 г, которым через рот ввели абамекур в дозе 2 мг/кг, и 30 самок массой 220-250 г. На 18-20-й день беременности самок убивали декапитацией. фертильность крыс-самцов определяли по соотношению числа подсаженных самок к количеству оплодотворенных.
Влияние абамекура на цитогенетическую активность проводили двумя методами: метафазным анализом клеток костного мозга самцов-крысят массой 80-100 г и микро-ядерным методом индукции доминатных летальных мутаций, используя взрослых крыс-самцов и самок массой 180-200 г. Абамекур вводили однократно через рот в дозе в дозе 2 мг/кг. Учитывали частоту структурных нарушений хромосом (метафазный тест) и оценивали процент клеток с микроядрами (ретикулоциты), в соответствии с рекомендациями [9].
Для оценки гонадотоксического влияния абамекура на гонады самок использовали 10 крыс-самцов массой 250г и 30 самок массой 220-250 г, которым через рот вводили препарат в дозе в дозе 2 мг/кг. Ежедневно к 3 самкам подсаживали по 1 самцу в соответствии со стадиями сперматогенеза: зрелые сперматозоиды – 1-ая неделя после введения препарата; поздние сперматозоиды – 2-ая неделя; ранние сперматиды – 3-я неделя; поздние сперматоциды – 4-ая неделя, ранние сперматоциды – 5-ая неделя. Беременных самок убивали декапитацией на 18-20 дни беременности. Результаты учитывали согласно рекомендациям [1].
Достарыңызбен бөлісу: |