Жалпы микробиология оқу – әдістемелік нұсқауы Микроорганизмдердің жіктелуі

жүктеу/скачать 1,54 Mb.

бет	68/83
Дата	22.12.2021
өлшемі	1,54 Mb.
	#127757

1 ... 64 65 66 67 68 69 70 71 ... 83

Байланысты:
Методичка микробиология

Тікелей емес (пассивті) гемагглютинадия реакциясы (ТЕГР)

Студенттің өзіндік жұмысы

Талсырма 1 Агглютинация реакциясын қою (ингредиенттерді тексеру)

Зер ттеу күн і	Мақсаты	қолданылган ингредиенттер	Зерттеу барысы	қорытынды
1	Ингреди нттердің манызын зерттеу	N1 антисары су (гомологиялық) N2 антисары су (гетерологиялық) 3.физ.ертінді 4. физ. ертіндісін -дегі бактериялар қоспасы	Сабактың басында үш пробиркада тәжірибе қою, келесі схема бойынша:
			Ингредиенттер	Пробиркалар
			Ингредиенттер	1	2	3
			Антисары су N1.	1мл
			Антисары су N2.		1мл
			Физ.ертінді			1 мл
			Бактер. қоспасы	0.1	0.1	0.1

Пробиркаларды термостатта 2 сағатқа 37°С сактайды, қорытындысын сабақтың аяғында тексереді.

Тапсырма 2. Бөліп алған микробқа идентификациясын жасау үшін шыныда агглютинация реакциясын кою тәжірибиесі.

Зертгеу күн	Мақсаты	Ингредиент	Зерттеу барысы	Қорытынды
1	Бөліп алынган дакылда микробтың турін анықтау	Бөліп алынған дақыл	Шыныга агглютинацияланатын диагностикалық сары суын және физ. ерітідісін бір тамшыдан тамызады (бақыла-контроль). Әр бір тамшыға бактериялық іл-мекпен зерттейтін дақылды еңгізу, 2-3 мин кейін қай қоспада агглютинация болды екенін бақылайды. Бақылау - контроль қоспада тек қана жеңіл гомогенді лайлану байқалады. Тәжірибеде түйіршіктер көруге болады.

Ескерту: Иммундық сары су тамшысы бар бактериялық ілмекті физ.ертіндісіне қосуға болмайды. Микробтардың жабысуы тәжірибенің бірінші минутынан бастап көрінеді, шыныны сәл айналдырғанда қоспада түйіршіктер пайда бола бастайды, үлкейіп тамшының шетіне шығады. Бақылау қоспасында біркелкі гомогенді лайлану байқалады. Тәжірибенің қорытындысының суретін альбомға салу керек.

Тікелей емес (пассивті) гемагглютинадия реакциясы (ТЕГР)

Бұл реакция — агглютинация реакциясының бір түрі, негізгі принципі -эритроциттер өз беткейіне ертінді антигендер және гаптендерді жабыстыра (адсорбция) алатын қабілеті (бактерияларды, вирустарды және т.б. микроорганизмдерді). Осы жағдайда эритроциттер жаңа серологиялық арнайы қабілетке ие болады, сондықтан иммундық сары сулармен, гомологиялық адсорбцияланған антигендермен агглютинация реакциясына қатысады. Осындай эритроциттерді сенсибилизацияланған эритроциттер, эритроцитарлық диагаостикум деп атайды. Сенсибилизацияланған эритроциттерді алу үшін эритроциттерді алдын-ала танинмен 1:20000 ертіндіде өңдейді, бұл жағдайда олардың адсорбцияланатын қабілеті (жабысу) жоғарлайды. Реакцияны полистеролдық плашнетаға немесе пробиркада жасайды. Тексерілетін қан сары суындағы комплементтен ажырату үшін алдын ала 58°С 30 мин қыздырады. Сосын сары судан ертінді қатарын дайындайды 1:10-нан 1:12000-ге дейін және одан жоғары, 0.5 мл пробиркаларға немесе планшета лункаларына құяды. Әр сары су ертіндісіне 0.1 мл эритроцитарлық диагностикум қосады. Реакцияны бөлме температурасында 2 сағат ұстайды немесе термостатта. Қорытындысы оң + - егер пробирка немесе лунка түбіндегі эритроциттер тұнбасының шеттері иректелген - қол шатыр теріздес. Реакцияның қорытындысы теріс - жағдайда эритроциттер тұнбасы біркелкі түбіне түседі, түйме тәріздес.

Тапсырма 3. ТЕГР (РПГА) қою төжірибесі (ауру адамның микробқа қарсы антидснелерін табу үшін). Серодиагностика.

Зерітеу күні	Мақсаты	Зерттелетін материал	Зерттеу барысы	қорытынды
1	Ауру адамның сары суында антиденелердің титрі жоғарлауын анықтау	І.Ауру адамның сары суы 8 тәулікте 1:50 2.Ауру адамның сары суы 15 тәулікте 1:50	ТЕГР қою.

ТЕГР-ны қою схемасы (Видаль реакциясы - іш сүзектің диагностикасы)

Ингредиенттер	Пробиркалар номері және ертінділері
Ингредиенттер	1 1:50	2 1:100	3 1:200	4 1:400	5 1:800	6 к
1.Сары су (1:50) аурудың 8 немесе 15 төулігіндегі	1.0				1.0 құйып тастау
2.Физ.ертінді	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
3. Эритроцитарлық диагностикум	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1

Ескерту: бірінші пробиркадан 1,0 мл екіншіге апару, 2-ші пробиркадан 3-ге, 3-ші пробиркадан - 4-ге, 5-ден 1,0 мл дез.ертіндісіне құйып тастау. Диагностикумның 0,1 мл-ден әрбір пробиркаға енгізу, 2 сағатқа термостатқа қою немесе бөлмеде сақтау. Қорытындысын 2 сағаттан кейін жүргізеді.

ТЕГР-ны есептеу, альбомға сурет салу, зерттеген сары судың титрін анықтау.

жүктеу/скачать 1,54 Mb.

Достарыңызбен бөлісу:

1 ... 64 65 66 67 68 69 70 71 ... 83