Техника приготовления мазков крови

66 
зольном щелоке. Прокипячённые в зольном щелоке стёкла, затем хорошо про-
мывают в проточной воде, вытирают чистой сухой тряпочкой и помещают в 
смеси спирта с эфиром (в равных частях). Перед работой стекла вынимают с 
помощью пинцета и насухо вытирают чистым полотенцем. Лучшими стеклами 
являются приготовленные из фотопластинок, так как они не имеют пузырьков и 
поверхность их ровная и чистая.
В случае нужды можно использовать и старые стёкла, бывшие в употреб-
лении. После просмотра и браковки негодных стёкол их подвергают тщатель-
ной обработке и очистке после этого хранят в смеси спирта с эфиром. 
 
Первую каплю крови удаля-
ют ваткой, а из второй капли изго-
тавливается мазок. Кровь необхо-
димо использовать, возможно, бы-
стрее, пока она не претерпела из-
менений и не потеряла своих физи-
ческих свойств. Быстронаступаю-
щее свёртывание крови делает при-
готовление мазка совершенно не-
возможным. Мазки получаются 
ровными, однородными и не имеют 
прерывистых линий (гармошка).
При приготовлении мазка 
предметное стекло зажимается ме-
жду большим и средним пальцами 
левой руки. В правой руке нахо-
дится шлифованное покровное 
стекло. 
Капля крови снимается при-
косновением поверхности пред-
метного стекла. У беспокойных 
животных каплю крови можно 
снять углом покровного стекла, а 
затем перенести её на предметное 
стекло. Для получения мазков хо-
рошего качества необходимо брать небольшие капли крови.
Прислонив край покровного стекла к капле крови, которая находится на 
предметном стекле, дают возможность распределиться ей между двумя стёкла-
ми (Рис. 33). Если стёкла чистые и сухие, кровь, в силу капиллярности, распре-
Рисунок 33. 
Техника изготовления мазка крови
Рисунок 34. Схематичное изображение 
мазков крови: 
1 – приготовленный на плохо обезжи-
ренном стекле; 
2 – короткий; 
3 – неравномерный; 
4 – толстый; 
5 – правильно приготовленный.

67 
деляется почти моментально. Угол между покровным и предметным стеклом не 
должен превышать 45-50
0
. Покровное стекло фиксируется между пальцами 
правой руки так, чтобы кончик одного или обеих пальцев касался края пред-
метного стекла. В этих случаях мазки получаются с ровными краями. Передви-
гая покровное стекло по предметному спокойно и не очень быстро, приготов-
ляют мазок. Кровь при движении покровного стекла движется (тянется) за 
стеклом, а не впереди его, и не подвергается «травмированию». Такие мазки 
называют «вытяжными», что даёт довольно точное определение процесса их 
изготовления. 
Приготовленный мазок необходимо сейчас же высушить. Летом это мож-
но сделать, положив его в перевёрнутом виде на спичку. Переворачивание 
стекла мазком вниз необходимо делать потому, что летом мазки очень часто 
портятся насекомыми. При работе в сыром и холодном помещении мазки мож-
но высушивать на руке, а затем убирать в боковой карман, прикрыв его предва-
рительно чистым стеком с целью сохранения мазка от повреждения.
Если изготовление мазков производится на морозе 10-15
0
, то для предот-
вращения гемолиза, когда они внесены в помещение, их нужно сразу же опус-
тить в кювету с метиловым спиртом и в таком случае нести в тёплое помеще-
ние.
После фиксации в спирте в течение 5-10 минут мазки окрашиваются 
обычным методом. Обработанные таким образом мазки ничем не отличаются 
от сделанных в сухом и тёплом помещении и могут быть использованы для са-
мых тонких гематологических исследований.
Просушивание мазков на пламени горелки не рекомендуется, так как 
форменные элементы крови деформируются и мазки становятся непригодными 
для исследования. Когда мазок высох, на нём пишется порядковый номер, 
кличка животного или номер, а также дата приготовления мазка.
Для окраски и исследования отбираются лучшие мазки. Хороший мазок 
должен отвечать следующим требованиям (Рис. 34):
Он должен быть уже и короче стекла, т.е. должен иметь свободные края 
по длине и зазубренный край по ширине в конце мазка. Края мазка должны 
быть ровными.
Мазок должен быть тонким, гомогенным, без просветов и прерывающих 
линий, с нежной поверхностью и без следов гемолиза. 
При дальнейшем хранении препаратов необходимо оберегать их от насе-
комых, влаги, действия кислот и щелочей, дыма и различных газов. Плохо со-
храняемые мазки становятся иногда совершенно непригодными для исследова-
ния, несмотря на качественное приготовление их вначале. 
 

68 
Фиксация мазков 
Наиболее надежным способом фиксации мазков является фиксация мети-
ловым спиртом. Спирт можно наслаивать непосредственно на мазок высоким 
слоем, препарат должен лежать горизонтально. Можно препарат погрузить в 
кювету с метиловым спиртом на 3-5 мин. накрыв ее крышкой (в целях предот-
вращения улетучивания фиксатора). Спирт можно использовать вторично. 
Также в качестве фиксаторов используют: 
абсолютный этиловый спирт время экспозиции 20-30 мин. 
чистый ацетон – 5мин. 
метиловый спирт+ацетон – 5мин. 
этиловый спирт+эфир (1:1) - 10мин. 
окраска по Май-Грюнвальду и Лейшману не требует предварительной 
фиксации, т.к. элементы фиксации содержатся в самой краске. 
Окраска мазков 
Для окрашивания пользуются готовыми растворами краски. Правильно 
окрашенный мазок имеет красновато-фиолетовый оттенок. Перекрашенные 
мазки имеют густо фиолетовые цвета. Серые или серо-голубые мазки указыва-
ют на избыток щелочи, ярко красные – на избыток кислоты или кратковремен-
ное окрашивание. Для получения правильной окраски важно помнить, чтобы 
дистиллированная вода, которой пользуются в процессе обработки препарата, 
имела нейтральную реакцию. 
Для определения реакции воды можно использовать гематоксилин. В хи-
мический стаканчик на кончике ножа опускают гематоксилин и несколько мил-
лилитров испытываемой дистиллированной воды. В другой стаканчик для кон-
троля наливают дистиллированной воды известной реакции. Оба стаканчика 
помещают на лист белой бумаги. Если испытуемая вода имеет нейтральную ре-
акцию, то в промежутке времени от одной до пяти минут она окрашивается в 
розово-фиолетовый цвет. Если вода кислая, то окрашивание наступает только 
через 15-20 минут. Если вода щелочной реакции, то она окрашивается в резко 
фиолетовый цвет в течение полминуты, максимум одной минуты. Кислую дис-
тиллированную воду усредняют 1% раствором карбоната натрия, а щелочную 
1% раствора уксусной кислоты. 
Окраска по Романовскому-Гимза (Рис. 35). 
Краска (заводского приготовления) имеет состав: азур2 - 3г, водораство-
римый желтый эозин - 0,8г, метиловый спирт 250 мл, глицерин - 250 мл. Перед 
употреблением краска разводится из расчета 1-2 капли на 1 мл дистиллирован-
ной воды. Окрашивание продолжается 30мин.

жүктеу/скачать 2,36 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: