Сборник международной научно-практической
жүктеу/скачать 11,88 Mb. Pdf көрінісі
|
Сборник зимней школыы 2019
| Результаты исследований
В процессе культивирования на искусственных питательных средах в биомассе гриба и культуральной жидкости накапливается целый ряд природных веществ, относящиеся к различным классам, но обладающие одним общим свойством – физиологической активностью и объединенные по этому признаку в единую группу ФАС. Антибиотической активностью могут обладать не только антибиотики, но и алкалоиды, пептиды, фенольные соединения, липиды, терпеноиды, полисахариды и др. При этом фактически для каждого класса, в свою очередь, характерно исключительное многообразие структурных типов. Особенностью штаммов-антагонистов является их способность синтезировать и накапливать в значительном количестве ФАС как отдельного класса, так и группы, которые в ряде случаев усиливают действие друг друга. Объектами исследований служили: - 2 штамма микроскопических грибов, обладающих высокой антагонистической активностью, относящиеся к роду Trichoderma sp. (75, 10) Культивирование штаммов проводили глубинным способом на питательных средах: соевой, Аркамона, АБЕ и Рейстрика. Экстракцию мицелия и культуральной жидкости осуществляли 70% этиловым спиртом и хлороформом. Хроматографический анализ проводили на пластинах Silufol 254 УФ и кизельгеле, с использованием различных систем растворителей и стандартных веществ. Выявление индивидуальных компонентов микроскопических грибов проводили в условиях, характерных для различных классов природных соединений. В экстрактах грибов были выявлены фракции, относящиеся к эргоалкалоидам: элимоклавин, оксалин, гризеофульвин. Среди фенольных соединений обнаружены нарингин, рутин, бензойная, ферулловая, ванилиновая, галловая, вератровая и пропионовая кислоты. Полипептидные фракции микроскопических грибов определяли по содержанию свободных и связанных аминокислот в экстрактах мицелия и культуральной жидкости штаммов. Установлено, что в полипептидных фракциях в достаточно большом количестве содержится DL-аланин как в мицелии, так и в культуральной жидкости штамма 75 . Пептиды с L-аспарагиновая кислотой, L-серином, L-лизином и L-пролином содержатся в экстракте мицелия штамма 10. Связанного с DL-триптофаном пептида достаточно много (24,5 мг/мл) синтезируется штаммом 75. В результате наших исследований было установлено, что компонентный состав метаболитов микроскопических грибов может меняться в зависимости от условий культивирования продуцентов. Так, оптимальной для биосинтеза полисахаридных фракций, в составе которых обнаружены углеводы: галактоза, глюкоза, мальтоза, фруктоза, манноза, сахароза, рамноза является среда Чапека с сахарозой. При росте гриба на этой среде наблюдается максимальный выход фракций на 6 сутки. Что касается температурного режима, то наиболее благоприятным оказался диапазон 25-28 0 С. Более низкие 22-23 0 С и высокие 29- 31 0 С температурные режимы отрицательно влияли на рост культур и синтез биологически активных соединений. Кроме фракций, состоящих из перечисленных выше углеводов, отмечены комплексы не установленного состава. Наиболее разнообразный синтез веществу большинства штаммов происходит на соевой среде. Максимальный выход фенольных фракций отмечен на 5 сутки роста на соевой среде с глюкозой. 172 Пептидные фракции, связанные с L- лизином HCl, максимально содержится в биомассе гриба на 10 сутки роста на среде Чапека с сахарозой. Следует отметить, что накопление биомассы гриба также зависит от среды культивирования. Так, наибольший выход биомассы наблюдается при росте гриба на соевой среде с глюкозой на 7 сутки, наименьший выход – на среде Чапека с сахарозой на 6 сутки. Обнаруженные фракции метаболитов из различных классов природных соединений были элюированы в растворы и в концентрации 1% протестированы в отношении возбудителей болезней овощных и зерновых культур. Установлено, что эргоалкалоид элимоклавин в основном подавляют рост грибных возбудителей болезней Fusarium oxysporum, Alternaria alternata, Helminthosporium sp., Sclerotinia sclerotiorum Среди фенольных соединений следует отметить бензойную и ванилиновую кислоты, как перспективные препараты, подавляющие развитие патогенов возбудителей альтернариоза и фузариоза семян. Фракции полисахаридов наименее активны, из 12 выделенных соединений этого класса подавляют развитие альтернариоза только три, действия на другие патогены не наблюдалось. Фракции, содержащие DL-аланин и жүктеу/скачать 11,88 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|