Қазақстан республикасы ауыл

280
УДК 6/9:616-084:579.842.11:636.22/28 
ИЗУЧЕНИЕ ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ВАКЦИНЫ 
НА ОСНОВЕ РЕКОМБИНАНТНОЙ СУБЪЕДИНИЦЫ В ТЕРМОЛАБИЛЬНОГО 
ТОКСИНА 
ESCHERICHIA COLI
 У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Новикова О.Н., к.в.н.,ведущий научный сотрудник, доцент
Ананчиков М.А., к.в.н,ведущий научный сотрудник, доцент 
Зубовская И.В., зав. лабораторией диагностики
Дадашко С.В., младший научный сотрудник
Гордиевская О.Н., ветеринарный врач
РУП «Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского»
г. Минск, Республика Беларусь
Известно, что вакцинация является лучшим способом профилактики инфекционных 
заболеваний, обусловленных действием бактериальных токсинов. К числу таких забо-
леваний относят колибактериоз, вызванный энтеропатогенными и энтеротоксигенными 
штаммами. Энтеропатогенные и энтеротоксигенные штаммы эшерихий обладают спо-
собностью синтезировать термолабильные и термостабильные энтеротоксины [1, 2]. 
Термолабильный энтеротоксин состоит из пяти В субъединиц и одной А субъедини-
цы. Cубъединица В термолабильного токсина связывается с моносиаловым ганглиози-
дом (GM1) на поверхности клеток интестинального эпителия и инициирует каталитиче-
скую активность А субъединицы термолабильного токсина внутри энтероцитов [3]. Из 
анализа литературных данных последних лет [4] следует вывод о том, что перспектив-
ным направлением инноваций в разработке вакцин для профилактики болезней, вызван-
ных энтеропатогенными и энтеротоксигенными штаммами E. coli, является включение в 
их состав факторов патогенности и, в первую очередь, токсоидов либо рекомбинантных 
белков термолабильного токсина. Кроме того, рекомбинантные белки термолабильно-
го токсина могут входить и в другие более сложные рекомбинантные конструкции, ис-
пользуемые при создании вакцин [5]. Таким образом, включение в состав поливалентных 
вакцин для профилактики желудочно-кишечных заболеваний телят термолабильного 
токсина E. coli может существенно повысить профилактический эффект вакцинации и 
экономический эффект от их применения. 
Вакцину инактивированную эмульгированную для профилактики колибактериоза и 
клебсиеллеза крупного рогатого скота изготавливали из штаммов бактерий E. coli («КМИ-
ЭВ-98»), E. coli («КМИЭВ-В146»), E. coli («КМИЭВ-39A»), E. coli («КМИЭВ-В160») се-
рологических групп F41, К99 (F5), А20 (F17) и К88 (F4) соответственно рекомбинантной 
субъединицы В термолабильного токсина (rLTb) (производства «Институт микробио-
логии» НАН Беларуси) и штамма бактерий Klebsiella pneumoniae («КМИЭВ-В106»). В 
качестве адъюванта использовали Мontanide ISA 61 VG (Seppic, Франция) - опыт. Жи-
вотных контрольных групп иммунизировали согласно схеме хозяйства вакциной инак-
тивированной эмульгированной для профилактики колибактериоза и клебсиеллеза телят 
(производства РУП «Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесско-
го») - контроль.
До вакцинации и на разных сроках после вакцинации у животных отбирали кровь и 
определяли уровень антител к антигенам, входящим в состав вакцины. Уровень антител 
к rLTb E. coli выявляли в тест-системе ИФА (РУП «Институт экспериментальной ве-
теринарии им. С.Н. Вышелесского»). Количество антител к корпускулярным антигенам 
вакцины в крови КРС определяли общепринятым методом в реакции агглютинации.
Статистическую обработку экспериментальных данных осуществляли с помощью 
критерия Стьюдента для независимых выборок.

281
Как видно из материалов, представленных в таблицах 1, 2, у стельных коров и телят 
отмечали высокие фоновые антитела к корпускулярным антигенам, входящих в состав ис-
пытуемой вакцины. Высокий уровень фоновых антител к rLTb у коров свидетельствовал 
о циркуляции эпизоотических токсинообразующих штаммов E. coli среди взрослого по-
головья животных. В группе коров, иммунизированных вакциной сравнения (контроль), 
отмечали уменьшение уровня антител к rLTb, что обусловлено снижением инфекцион-
ной нагрузки на организм животных эпизоотических штаммов E. coli, циркулирующих 
в хозяйстве. Достоверные различия в уровне антител к rLTb в опытной и контрольной 
группах коров и телят свидетельствуют об иммуногенной активности антигена rLTb, 
входящего в состав вакцины.
В группе животных, иммунизированных опытной вакциной, отсутствовали клиниче-
ские признаки диспепсии, сохранность телят составила 100% .
Таблица 1 - Определение уровня специфических антител в крови
вакцинированных коров 
Группа животных, 
коровы
Результат РА (log2),
Результат 
ИФА (ОП)
антигены E. coli
антиген
К. pneumonia
Антиген -
рекомбинантная 
субъединица В 
термолабильного 
токсина
E. coli
К88
К99
А20
F41
Фон до
вакцинации
3,5±0,3
5,0±0,6
4,0±0,5
2,0±0,4
5,3±0,6
1,34±0,05
Опыт 21-е сутки 
после 
вакцинации
4,0±0,4
5,3±0,4
5,3±0,4
3,0±0,5
6,0±0,4
1,39±0,04*
Контроль 21-е сут-
ки после 
вакцинации
4,0±0,4
5,6±0,5
5,0±0,6
3,0±0,4
5,6±0,5
1,10±0,06
Примечание: * - достоверное различие по сравнению с контролем при р≥0,01.
Таблица 2 - Определение уровня специфических антител в крови
вакцинированных телят 
Группа животных, телята
Результат РА (log2),
Результат 
ИФА (ОП)
антигены E. coli
антиген
К. 
pneumonia
Антиген -
рекомбинантная 
субъединица В 
термолабильно-
го токсина
E. coli
К88
К99
А20
F41
Фон до
вакцинации
(возраст 5-10 дней)
4,3±0,4 3,0±0,3
2,0±0,3
3,3±0,4
4,5±0,5
0,85±0,03
Опыт 21-е сутки после 
вакцинации
4,8±0,5 4,0±0,3
2,8±0,4
3,8±0,5
4,8±0,4
0,76±0,03**
Контроль 21-е сутки после 
вакцинации
4,2±0,4 4,0±0,3
3,0±0,3
3,6±0,4
4,6±0,5
0,65±0,03
Примечание: ** - достоверное различие по сравнению с контролем при р≥0,05.
Таким образом, полученные экспериментальные данные позволяют сделать заклю-
чение о безвредности и иммуногенной активности вакцины на основе рекомбинант-

282
ной субъединицы В термолабильного токсина Escherichia coli для крупного рогатого 
скота. .Рекомбинантная субъединица В термолабильного токсина Escherichia coli в со-
ставе поливалентной вакцины обладает иммуногенными свойствами и способствует 
росту выработки специфических антител в крови животных. Ветеринарный препарат 
«Колитокс-LT» вписывается в технологию профилактических вакцинаций инфекцион-
ных заболеваний крупного рогатого скота на молочно-товарных фермах и комплексах по 
производству молока.

жүктеу/скачать 5,46 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: