Омарова аккенже бердихановна

111 
Caco-2
жасушалары 75 см
3
құтыларда өсінділер жасушаларымен бірге 
(Зарштедт, 
Инк., 
Ньютон, 
Северная 
Каролина, 
США) 
Dulbecco 
модифицирленген 10% инактивтелген жылы бұқа эмбриондық сарысуы 
(EuroClone, Siziano, Италия), 2 мм L-глутамин, 1% (В/В), пенициллиннің 
алмастырғыш аминқышқылдары 100 ед/мл және стрептомицин 100 мкг/мл 
(Сигма-Алдричтің барлық толықтырулары) қосылған (МДСИ) негізгі қоректік 
ортасын (EuroClone, Siziano, Италия) қолдану арқылы өсірілді. 
Өсінділік қоректік орта әрбір 2-3 күн сайын жаңартылып отырды. Сасо-2
жасушалары 2,5x10
5
концентрациялы ұяшықтарға 24-ұяшықты өсінділік 
планшетке іріктелініп алынды. Жасушалар 2 апта бақылауда болды, олар 37°С
5% СО2-мен байытылған қоректік ортада инкубацияланды.
Бактериялық штаммдар МРС сорпасында 37ºС температурада түнде 
өсіріліп, 
PBS-мен 
жуылды. 
Бактериялық 
штаммдар 
1x10
8
КТБ/мл 
концентрациясына DMEM-де өсіріліп, әрбір шұңқырға енгізіліп, 2 сағат бойы 
инкубацияланды. Инкубациядан кейін жасушалар төрт рет 0,1% х-100 
Тритонмен (Сигма-Алдрич) жуылды. Клеткалық лизаталар жүйелі түрде МРС 
пластиналарына агар дубликаттарына себінді жасалды. Содан кейін планшеттер 
37 ºC температурада 2 күн бойы инкубацияланып, колония құраушы бірліктерді 
санадық. Штаммдардың адгезиялық қабілеті бактериялардың пайызымен 
есептеледі. Әр күн сайын жасалған үш биологиялық қайталаулар және әрбір 
биологиялық қайталауға арналған үш сынамалар осы тест үшін қолданылды. 
Зерттеу нәтижесін есептегенде сұйылту дәрежесі ескеріліп, орташа 
арифметикалық шама анықталды. 
Cурет 12 - 
Lb.acidophilus21ch-4 
штаммының колония түзуші бірліктері

112 
Кесте 20 - Caco-2 жасушалық моделін пайдалана отырып, in vitro 
штаммдарының адгезивті қасиеттерін зерттеу нәтижелері 
Өсінді 
Әрбір тәжірибенің 
орташа адгезия мәні 
Адгезия индексі 
+-SD 
LGG 
2.43 Е +0.6 
2.59 Е +0.6 
5.50 Е +0.5 
4.80 Е +0.6 
LC 705 
4.90 Е +0.6 
2.87 Е +0.5 
5.07 Е +0.4 
3.20 Е +0.5 
Str.thermophilus 042k-2 
3.10 Е +0.5 
1.23 Е +0.6 
2.63 Е +0.6 
7.50 Е +0.5 
Lc.lactis 010k 
2.60 Е +0.6 
3.36 Е +0.6 
5.87 Е +0.6 
1.60 Е +0.6 
Lb. acidophilus 021ch-4 
1.97 Е +0.6 
4.21 Е +0.6 
5.93 Е +0.6 
4.73 Е +0.6 
Lb.bulgaricus 08ch-1 
2,05 Е +0.6 
4,26 Е + 0,6 
5,91 Е +0.6 
4,80 Е +0.6 
Lb. acidophilus 015k-1 
2,27 Е +0.5 
4,31 Е + 0,6 
5,74 Е +0.6 
4,91 Е +0.5 
0
1
2
3
4
5
LGG
LC 705
042k-2
010k
021ch-4 08ch-1
015k-1
Сасо-2 адгезияға жасалған тест
Адгезияға Сасо-2 тесті
Сурет 13 - Caco-2 жасушалық моделін пайдалана отырып, in vitro 
штаммдарының адгезиялық қасиеттерінің көрсеткіштері. 

113 
Адамның эпителиалды жасушалары желісінің көмегімен пробиотикалық 
штаммдардың адгезивті қасиеттерін зерттеу бактериялардың Сасо-2 адам 
ішегінің колоноректальды карциномасының эпителиалды жасушаларының 
жасушалық қабырғасымен бірқабатты байланысқан бактерияларды санауға 
негізделген. 
Нәтижесінде сүт қышқылды бактериялардың 
Lc.lactis 010k, Lb.acidophilus 

жүктеу/скачать 8,57 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: