Схема метода:
Этап
|
Вещество
|
Время обработки
|
Основной краситель
|
Генцианвиолет (кристаллвиолет)
|
1-2'
|
Фиксатор
|
Р-р Люголя
|
1-2'
|
Дифференцирующее вещество
|
Спирт этиловый 96°
|
5-10"
|
Промывка
|
Вода
|
|
Дополнительный краситель
|
Водный фуксин
|
1-2'
|
Промывка
|
Вода
|
|
Принцип метода:
.
.
.
.
.
.
.
Выявление капсул по Бурри и Бурри-Гинсу.
Схема метода:
Этап
|
Вещество
|
Время обработки
|
Негативное контрас- тирование фона (по Бурри)
|
Черная тушь (смешивают с исследуемой культурой)
|
—
|
Фиксация
|
В пламени спиртовки
|
|
Окраска микробных клеток (по Гинсу)
|
Водный фуксин
|
1-2 '.
|
Промывка
|
Вода
|
5-10"
|
Принцип метода:
.
.
.
.
.
.
Окраска кислотоустойчивых бактерий по Цилю-Нильсену.
Схема метода:
Этап
| Вещество |
Время обработки
|
Основной краситель
|
Карболовый фуксин Циля при нагревании
|
3-5'
|
Дифференцирующее вещество
|
Р-р серной кислоты
|
1-2'
|
Промывка
|
Вода
|
5-10"
|
Дополнительный краситель
|
Метиленовый синий
|
3-5'
|
Промывка
|
Вода
|
5-10"
|
Принцип метода:
.
.
.
.
.
.
Окраска спор по Ожешко
Схема метода:
Этап
| Вещество |
Время обработки
|
Протравливание
|
Раствор соляной кислоты при нагревании
|
2-3'
|
Промывка
|
Вода
|
5-10"
|
Фиксация
|
В пламени спиртовки
|
|
Основной краситель
|
Карболовый фуксин Циля при нагревании
|
8-5'
|
Дифференцирующее вещество
|
Раствор серной кислоты
|
1-2'
|
Промывка
|
Вода
|
5-10"
|
Дополнительный краситель
|
Метиленовый синий
|
3-5'
|
Промывка
|
Вода
|
5-10"
|
Принцип метода:
.
.
.
.
.
Окраска по Романовскому-Гимзе простейших.
Схема метода:
Этап | Вещество | Время обработки |
Фиксация
|
смесь Никифорова
|
|
Покраска
|
Азур-эозин
|
20'
|
Промывка
|
Вода
|
5-10"
|
Принцип метода:
.
.
.
.
Окраска по Нейссеру зерен волютина.
Схема метода:
Этап | Вещество | Время обработки |
Основной краситель
|
Синька Нейссера
|
1-2'
|
Промывка
|
Вода
|
5-10"
|
Фиксатор
|
Растор Люголя
|
1-2'
|
Дополнительный краситель
|
Растор везувина
|
10-15"
|
Промывка
|
Вода
|
5-10"
|
Принцип метода:
.
.
.
.
ИССЛЕДОВАНИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ В ЖИВОМ СОСТОЯНИИ
В живом состоянии микроорганизмы исследуют с целью выявления их формы, подвижности или определения прижизненной внутренней структуры. Изучают нативные и окрашенные препараты, используя методы «раздавленной» или «висячей» капли.
Прижизненная (витальная) окраска. Взвесь микроорганизмов вносят в каплю 0,001% раствора метиленового синего или нейтрального красного. Затем готовят препарат «раздавленной» или «висячей» капли и микроскопируют его.
1. Приготовление раздавленной капли.
На предметное стекло стерильной петлёй наносят каплю бульонной культуры микробов. У края капли ставят на ребро покровное стекло и постепенно опускают его на каплю. В правильно приготовленном препарате жидкость тонким слоем заполняет пространство между стёклами, не выпуская, за края покровного стекла и не содержит пузырьков воздуха. На покровное стекло наносят каплю иммерсионного масла и изучают под микроскопом с объективом х 90.
2. Приготовление висячей капли.
Каплю бульонной культуры микробов наносят на середину покровного стекла и покрывают сверху предметным стеклом с лункой. Края лунки предварительно смазывают вазелином или касторовым маслом. Предметное стекло с прилипшим к нему покровным стеклом перевёртывают. Капля оказывается висящей в герметически закрытой влажной камере.
Микроскопия раздавленной и висячей капли производится с объективом 40х в затемнённом поле зрения (при опущенном вниз конденсоре).
ПРОТОКОЛ ЛАБОРАТОРНОЙ РАБОТЫ
ПРИГОТОВЛЕНИЕ И ОКРАСКА МИКРОПРЕПАРАТА ПО ГРАМУ
Латинское название _______________
Материал________________________
Окраска_________________________
|
|
Вопросы для самоконтроля
Режим работы бактериологической лаборатории
Морфология микроорганизмов
Отличия клеток прокариотов от эукариотов.
Виды микроскопического исследования
Бактериоскопический метод диагностики
Перечень вопросов и заданий для самостоятельной работы
1. По теме «Морфология микроорганизмов» заполнить разделы для самостоятельной работы в рабочей тетради: основные морфологические группы микроорганизмов; тинкториальные свойства; структура бактериальной клетки; принципы сложных методов окраски.
Основная литература
1.Воробьев А.А. Медицинская и санитарная микробиологиялогия: учеб. пособиен для студентов мед вузов/. А.А.Воробьев и др. – 4-е изд., стер.- М.:Академия, 2010.-461 с: ил.
2. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: учеб. для мед. вузов / А.И.Коротяев и др.- 4-е изд., испр. И доп..- СПб.: СпецЛит, 2008. – 767 с.
3. Медицинская микробиология/ под ред. Поздеева O.K. - М.:ГЭОТАР Медиа, 2006. – 765 с.
Дополнительная литература
1. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии : учеб. для студентов мед. вузов / под ред. А.С.Быкова, А.А. Воробьева, В.В.Зверева - 2-е изд.- М. : «Миа», 2008. - 272 с.
2. Воробьев А.А., Кривошеин Ю.С., Широбоков В.П. Медицинская и санитарная микробиология: учебное пособие для студентов высших медицинских учебных заведении / А.А. Воробьев, Ю.С. Кривошеин, В.П. Широбоков – 2-е изд., М.: Академия, 2006.
3. Емцев В.Т., Мишустин Е.Н. Микробиология: учебник для вузов -5-е изд., перераб. и доп. - М.: Дрофа, 2005.- 442с.
4.Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. Под ред. Зверева В.В., Бойченко М.Н. Учебник в 2-х томах, М.: ГЭОТАР- Медиа, 2010.
5.«Определитель бактерий Берджи». Под ред. Хоулта Дж., Крича Н., Смита П. И др. В двух томах. М.: «Медицина», 1982.
6. «Внутрибольничные инфекции». Под редакцией Венцела Р.П. М.: «Медицина»,1990.
7. Кузнецов Е.А. с соавт. Микробная флора полости рта и ее роль в
развитии патологических процессов. – М: «Медицина» -1996 г.
8. Боровский Е.В., Леонтьев В.К. Биология полости рта. – М: «Медицина». - 1991 г.
Тема: ФИЗИОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ. МЕТОДЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БАКТЕРИЙ. БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ (1ЭТАП).
Цель: Научиться технике взятия и первичного посева различных видов материала для бактериологического исследования.
Мотивация: Знание правил забора материала и условий культивирования микроорганизмов лежит в основе бактериологического метода диагностики.
Основные понятия, которые должны быть усвоены студентами в процессе изучения темы: рост и размножение микроорганизмов; культивирование микроорганизмов; питательные среды; аэробные и анаэробные микроорганизмы; бактериологический метод; культуральные свойства микроорганизмов; чистая культура микроорганизмов; идентификация микроорганизмов; фаготипаж; антигенная структура; факторы агрессии; биохимическая активность; патогенность, вирулентность; антибиотики; чувствительность микроорганизмов к антибиотикам.
Основные вопросы, разбираемые на занятии:
Фазы роста и размножения бактерий.
Питательные среды. Классификация и требования, предъявляемые к ним.
Основные принципы и методы культивирования аэробов и анаэробов.
Виды материалов для бактериологического исследования и правила их забора.
Фазы роста микроорганизмов
1. ________________________ 4. ________________________
2. ________________________ 5. ________________________
3. ________________________ 6. ________________________
Условия культивирования микроорганизмов
1) ________________________
2) ________________________
3)________________________
Классификация питательных сред:
По консистенции:
А) ________________________ Пример________________________
Б) ________________________ Пример________________________
В) ________________________ Пример________________________
По составу:
А) ________________________ Пример________________________
Б) ________________________ Пример________________________
По назначению:
А) ________________________ Пример________________________
Б) ________________________ Пример________________________
Требования, предъявляемые к питательным средам:
1) ________________________________________________
2) ________________________________________________
3)________________________________________________
Методы культивирования анаэробов:
Метод
|
Название
|
Принцип метода
|
Физический
|
1. _____________________
2. _____________________
3. _____________________
|
1. _____________________
2. _____________________
3. _____________________
|
Химический
|
|
|
Биологический
|
|
|
Виды и техника взятия материала для бактериологического исследования
Материал
|
Правила забора
|
Кровь
|
|
Мокрота
|
|
Ликвор (спиномозго вая жидкость)
|
|
Моча
|
|
Фекалии
|
|
Гной
|
|
Отделяемое кожных покровов
|
|
Отделяемое
зева, носа, уха
влагалища, цервикального канала.
|
|
ТРЕБОВАНИЯ,
ПРЕДЪЯВЛЯЕМЫЕ К ЗАБОРУ И ТРАНСПОРТИРОВКЕ МАТЕРИАЛА ДЛЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ:
Забор материала производят:
до начала антибактериальной терапии или перед введением очередной дозы;
из очага инфекции;
соблюдение асептики во избежание контаминации;
достаточное количество пробы;
в стерильную посуду;
соблюдение времени доставки (1,5-2 часа с момента забора);
наличие сопроводительного документа:
название учреждения, отделение, палата
№ истории болезни
ФИО, пол, возраст
предполагаемый диагноз
проводимая антибактериальная терапия
наименование материала
дата и время забора материала
подпись лица, осуществившего забор.
Вопросы для самоконтроля:
1. Виды и техника взятия материала для бактериологического исследования.
2. Посев различных видов материала на питательные среды
3. Условия культивирования микроорганизмов
Тема: БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ (2этап). МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР МИКРООРГАНИЗМОВ. МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ БИОХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ БАКТЕРИЙ.
Цель: Научиться выделять чистую культуру микроорганизмов, учитывать рост микроорганизмов на плотных и жидких питательных средах, делать пересевы петлей, работать стерильной пипеткой.
Мотивация: Умение выделять чистую культуру микроорганизмов необходимо для проведения идентификации микроорганизмов и определения чувствительности к антибиотикам и бактериофагам.
Основные вопросы, разбираемые на занятии:
Бактериологический метод диагностики инфекционных заболеваний, его возможности, достоинства, недостатки.
Методы выделения чистых культур бактерий.
Идентификация микроорганизмов и их внутривидовое типирование.
Способы изучения биохимических свойств бактерий: среды Гисса (пестрый ряд); система индикаторных бумаг (СИБы); панели биохимической идентификации; автоматизированные системы идентификации микроорганизмов.
Методы определения чувствительности бактерий к лекарственным препаратам.
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА МИКРООРГАНИЗМОВ
Культуральные свойства:_____________________________
Характер роста микроорганизмов на плотных питательных средах
_______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ Характер роста микроорганизмов на жидких питательных средах _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________
Чистая культура - _______________________________________________
Методы выделения чистых культур бактерий
Метод |
Принцип метода
|
Область применения
| Посев по Дригальскому |
|
|
Посев по Коху
|
|
|
Посев по Шукевичу
|
|
|
Методы идентификации микроорганизмов
Метод | Примеры |
По морфологии
|
|
По культуральным свойствам
|
|
По биохимической активности
|
|
По фаготипажу
|
|
По антигенной структуре
|
|
По факторам агрессии
|
|
Способы изучения биохимических свойств бактерий:
Среды «пестрого ряда» (среды Гисса).
Состав _____________________________________________________________ Принцип действия - ________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________2. Система индикаторных бумаг (СИБы). Состав: диски из фильтровальной бумаги, пропитанные питательными средствами (питательная основа + субстрат + индикатор) и высушенные, хранятся во флаконах. Принцип действия: диски добавляются к густой суспензии исследуемой культуры в физрастворе. Учет производят после 18-24 часовой инкубации в термостате по изменению цвета индикатора.
3.Панели биохимической идентификации.
Состав: в лунках специальных пластиковых панелей находятся соответствующие высушенные питательные среды (питательная основа + субстрат + индикатор).
Принцип действия: в лунки вносят суспензию исследуемой культуры и после инкубации (от 5 до 24 часов) учитывают результат по изменению цвета индикатора.
Примеры: Панель биохимической дифференцировки энтеробактерий – ПБДЭ (Россия), АРI –20Е (Франция), Crystal (США).
4.Системы автоматизированной идентификации.
Принцип действия тот же, что и в предыдущем методе, однако инкубация панелей, учет результатов и идентификация производится при помощи компьютера.
Примеры: MS-2 (США), Bioscreen (Финляндия), Sceptor (США).
Методы фаготипажа.
культура + бактериофаг
Метод
___________________
__________________
|
Метод
___________________
__________________
|
Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам
Метод бумажных дисков.
Принцип метода: на поверхность засеянной «газоном» на плотной питательной среде исследуемой культуры накладывают диски из фильтровальной бумаги, пропитанные антибиотиками (не более 6 дисков на чашку).
Учет результатов: после инкубации посевов в течении 24 часов учитывают чувствительность культуры к антибиотикам по диаметру зон подавления роста вокруг дисков.
Метод серийных разведений.
Принцип метода: в пробирках с жидкой питательной средой, готовим серийные разведения антибиотика. После чего во все пробирки вносим исследуемую культуру.
Учет результатов: проводят после инкубации посевов в течение 24 часов по наличию или отсутствию роста культуры в пробирках с определенной концентрацией антибиотика. Определяем минимальную ингибирующую концентрацию антибиотика для испытуемого штамма.
3. Метод Флеминга.
Принцип метода: на чашку с плотной питательной средой, содержащей антибиотик, наносят исследуемые культуры.
Учет результатов: проводят после инкубации посевов в течении 24 часов по наличию или отсутствию роста культуры на чашке. Определяем чувствительность нескольких культур микроорганизмов к данному виду антибиотика.
Вопросы для самоконтроля:
Методы выделения чистой культуры микроорганизмов.
Характер роста микроорганизмов на плотных и жидких питательных средах.
Методы идентификации микроорганизмов.
Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам
Тема: БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ (3 этап). ПАТОГЕННОСТЬ И ВИРУЛЕНТНОСТЬ БАКТЕРИЙ. ФАКТОРЫ АГРЕССИИ.
Цель: Научиться определению биохимических свойств бактерий и проводить качественную и количественную оценку чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.
Мотивация: изучение патогенности бактерий используется для определения вида возбудителя инфекционного заболевания.
Основные вопросы, разбираемые на занятии:
Патогенность и вирулентность бактерий.
Факторы агрессии вирулентности и патогенности микроорганизмов:
инвазионность; токсигенность; блокаторы лизосомальных ферментов (незавершенный фагоцитоз); антифагины; ферменты защиты и агрессии
Патогенность -___________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
Вирулентность-___________________________________________________________
Факторы агрессии микроорганизмов
Инвазионность -_____________________
__________________________________________________________________________
1. Факторы внедрения и распространения:
а). ___________________________________
б). ___________________________________
в). ___________________________________
г). ___________________________________
д). ___________________________________
е). ___________________________________
2. Факторы устойчивости к фагоцитозу:
а). ___________________________________
б). ___________________________________
в). ___________________________________
г). ___________________________________
3. Факторы обеспечивающие размножение:
_______________________________________
|
Токсигенность -___________________
__________________________________ __________________________________
Экзотоксины:
а). ______________________________
б). ______________________________
в). ______________________________
г). ______________________________
Эндотоксины:
а). ______________________________
б). ______________________________
|
Занятие № 6 Дата____________
Тема: БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ (Учет результатов). АНТИБИОТИКИ. МЕХАНИЗМ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ. ИТОГОВОЕ ЗАНЯТИЕ.
Цель: Научиться учитывать результаты определения биохимических свойств бактерий и антибиотикограммы. Познакомиться с принципами рациональной химио- и антибибиотикотерапии. Закрепить знания по разделу «Физиология бактерий».
Мотивация: изучение методов определения чувствительности бактерий необходимо для рациональной антибиотикотерапии.
Основные вопросы, разбираемые на занятии:
Определение понятия «антибиотики», их классификация по происхождению, эффекту и спектру действия.
Механизмы антибактериального действия.
Практическое применение антибиотиков, понятие о химиотерапии. Принципы рациональной химио- и антибибиотикотерапии.
Лекарственная устойчивость микроорганизмов и пути её преодоления.
Итоговый контроль по разделу «Физиология микроорганизмов ».
Принципы классификации антибиотиков
Классификация | Примеры |
По происхождению:
1).__________________________________
2).__________________________________
3).__________________________________
4).__________________________________
5). __________________________________
По способу получения:
1).__________________________________
2).__________________________________
3).__________________________________
По группам чувствительных микроорганизмов:
1).__________________________________
2).__________________________________
3).__________________________________
По конечному эффекту:
1).__________________________________
2).__________________________________
По спектру действия:
1).__________________________________
2).__________________________________
По механизму действия ( по мишени):
1).__________________________________
2).__________________________________
3).__________________________________
4).__________________________________
|
1)._____________________________
2)._____________________________
3)._____________________________
4).______________________________
5). _____________________________
1)._____________________________
2)._____________________________
3)._____________________________
1)._____________________________
2)._____________________________
3)._____________________________
1)._____________________________
2)._____________________________
1)._____________________________
2)._____________________________
1)._____________________________
2)._____________________________
3)._____________________________
4).______________________________
|
Принципы рациональной антибиотикотерапии
1)._________________________________________________________________________
2)._________________________________________________________________________
3)._________________________________________________________________________
4)._________________________________________________________________________
5). ________________________________________________________________________
Перечень вопросов и заданий для самостоятельной работы
По теме «Физиология микроорганизмов. Бактериологический метод диагностики» заполнить разделы для самостоятельной работы в рабочей тетради: Фазы роста микроорганизмов; Условия культивирования микроорганизмов; Классификация питательных сред; требования, предъявляемые к питательным средам; методы культивирования анаэробов; виды и техника взятия материала для бактериологического исследования; культуральные свойства микроорганизмов; методы выделения чистых культур бактерий; методы идентификации микроорганизмов; способы изучения биохимических свойств микроорганизмов; методы фаготипажа.
Основная литература
1.Воробьев А.А. Медицинская и санитарная микробиологиялогия: учеб. пособиен для студентов мед вузов/. А.А.Воробьев и др. – 4-е изд., стер.- М.:Академия, 2010.-461 с: ил.
2. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: учеб. для мед. вузов / А.И.Коротяев и др.- 4-е изд., испр. И доп..- СПб.: СпецЛит, 2008. – 767 с.
3. Медицинская микробиология/ под ред. Поздеева O.K. - М.:ГЭОТАР Медиа, 2006. – 765 с.
Дополнительная литература
1. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии : учеб. для студентов мед. вузов / под ред. А.С.Быкова, А.А. Воробьева, В.В.Зверева - 2-е изд.- М. : «Миа», 2008. - 272 с.
2. Воробьев А.А., Кривошеин Ю.С., Широбоков В.П. Медицинская и санитарная микробиология: учебное пособие для студентов высших медицинских учебных заведении / А.А. Воробьев, Ю.С. Кривошеин, В.П. Широбоков – 2-е изд., М.: Академия, 2006.
3. Емцев В.Т., Мишустин Е.Н. Микробиология: учебник для вузов -5-е изд., перераб. и доп. - М.: Дрофа, 2005.- 442с.
4.Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. Под ред. Зверева В.В., Бойченко М.Н. Учебник в 2-х томах, М.: ГЭОТАР- Медиа, 2010.
5.«Определитель бактерий Берджи». Под ред. Хоулта Дж., Крича Н., Смита П. И др. В двух томах. М.: «Медицина», 1982.
6. «Внутрибольничные инфекции». Под редакцией Венцела Р.П. М.: «Медицина»,1990.
7. Кузнецов Е.А. с соавт. Микробная флора полости рта и ее роль в
развитии патологических процессов. – М: «Медицина» -1996 г.
8. Боровский Е.В., Леонтьев В.К. Биология полости рта. – М: «Медицина». - 1991 г.
ПРОТОКОЛ ЛАБОРАТОРНОЙ РАБОТЫ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ 1-й день исследования Посев исследуемого материала __________________________________________ на ________________________________________.
Инкубация в термостате при _______° С 18-24 часа.
2-й день исследования.
1. Изучение морфологических, тинкториальных и культуральных свойств выросших микроорганизмов.
Изучаемые
свойства
|
Тип колоний
|
1
|
2
|
3
|
4
|
Культуральные свойства:
|
|
|
|
|
- форма колонии;
|
|
|
|
|
- размер колонии;
|
|
|
|
|
- цвет;
|
|
|
|
|
- край;
|
|
|
|
|
- поверхность;
|
|
|
|
|
- консистенция;
|
|
|
|
|
- характер гемолиза
|
|
|
|
|
Количество колоний
|
|
|
|
|
Морфология (мазок)
|
|
|
|
|
Окраска по Граму
|
|
|
|
|
Для выделения чистой культуры пересев изолированной колонии на
|
|
|
|
|
Инкубация в термостате при _______° С 18-24 часа.
3-й день исследования.
1). Визуальная и микроскопическая проверка чистоты выделенной культуры.
Результат
|
МПА
|
Сахарный бульон
|
Морфология
|
|
|
Окраска по Граму
|
|
|
2). Постановка биохимических тестов:
Микроорганизм
|
|
|
Сахаролитическая активность
Протеолитическая активность
|
|
|
3). Посев для определения чувствительности выделенной культуры к антибиотикам методом бумажных дисков.
Принцип метода: приготовить 2 млрд. взвесь изучаемой культуры по стандарту мутности, произвести посев «газоном» на чашку с плотной питательной средой (Мюллера-Хинтона), подсушивают и накладывают диски из фильтровальной бумаги, пропитанные антибиотиками (не более 6 дисков на чашку).
Учет результатов: после инкубации посевов в течении 24 часов учитывают чувствительность культуры к антибиотикам по диаметру зон подавления роста вокруг дисков.
Антибиотик
|
Обозначение диска
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Инкубация в термостате при __°С 24 часа.
4) Фаготипаж.
Принцип метода: приготовить 2 млрд. взвесь изучаемой культуры по стандарту мутности, произвести посев «газоном» на чашку с плотной питательной средой (Мюллера-Хинтона), подсушивают и наносят 1 каплю бактериофага по секторам.
Учет результатов: после инкубации посевов в течении 24 часов учитывают чувствительность культуры к бактериофагу по зоне подавления роста.
Укажите номера бактериофагов:
1. _______________________________________________________________
2. _______________________________________________________________
3. _______________________________________________________________
4. _______________________________________________________________
5). Определение чувствительности выделенной культуры к зубным пастам
Принцип метода: приготовить 2 млрд. взвесь изучаемой культуры по стандарту мутности, произвести посев «газоном» на чашку с плотной питательной средой (Мюллера-Хинтона), подсушивают и наносят зубные пасты по секторам.
Учет результатов: после инкубации посевов в течении 24 часов учитывают чувствительность культуры по зоне подавления роста.
Укажите названия зубных паст:
1. _______________________________________________________________
2. _______________________________________________________________
3. _______________________________________________________________
4. _______________________________________________________________
5. _______________________________________________________________
6. _______________________________________________________________
7. _______________________________________________________________
8. _______________________________________________________________
9. _______________________________________________________________
10. _______________________________________________________________
4-й день исследования.
1). Учет результатов биохимической активности:
1. _______________________________________________________________
2. _______________________________________________________________
2). Учет результатов чувствительности к зубным пастам:
Название зубной пасты
|
Диаметр зоны задержки роста
|
Результат
|
1.
|
|
|
2.
|
|
|
3.
|
|
|
4.
|
|
|
5.
|
|
|
3). Учет результатов фаготипажа:
Стерильная зона образовалась в секторе, значит выделенная культура соответствует бактериофагу .
5). Выдача ответа.
Из материала от больного выделена чистая культура _____________ ____
чувствительная к ___________________________________________________________
_____________________________________________________________________________,
соответствующая бактериофагу__________________________________________________.
РАЗДЕЛ 2. СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ
Тема: АНТИГЕНЫ И АНТИТЕЛА.
Цель: Ознакомиться со строением и основными свойствами антигенов и антител.
Разобрать методику получения и использования биопрепаратов содержащих антигены и антитела для диагностики и профилактики.
Мотивация: Знание функций и строения антигенов и антител лежит в основе иммунологических реакций.
Основные понятия, которые должны быть усвоены студентами в процессе изучения темы: антигены; свойства антигенов; антигенная структура бактериальной клетки; антигенная структура вирусной частицы; антитела; диагностикумы; диагностические сыворотки.
Основные вопросы, разбираемые на занятии:
Антигены. Свойства антигенов.
Антигенная структура бактериальной клетки.
Антигены вирусов. Гетероантигены.
Получение и использование антигенов для диагностики и профилактики.
Антитела (иммуноглобулины).
Свойства иммуноглобулинов.
Получение и использование сывороток для диагностики и лечения.
Антигены -_______________________________________________________________.
Основные свойства антигенов:
_________________________________
_________________________________
_________________________________
_________________________________
_________________________________
Антигенная структура бактериальной клетки
3 а) H-антиген
1 б) O-антиген
в) K-антиген
4 г) L,B,Vi-антиген
2 д) A,M -антиген
5
Антигенная структура вирусной частицы
1 а) углеводистые рецепторы
б) ферменты
2 в) капсид
г) гемагглютинин
4 3
Строение иммуноглобулинов
3 а) Fab-фрагмент
4 б) Fc-фрагмент
2 в) тяжелая цепь
г) легкая цепь
5 д) активный центр
Применение антигенов и антител (БИОПРЕПАРАТЫ)
Все биопрепараты делятся на:
биопрепараты, содержащие антигены :
а) лечебно-профилактические биопрепараты, содержащие антигены :
вакцины (живые) .
.
.
.
вакцины убитые .
.
.
.
вакцины химические .
.
.
генно-инженерные вакцины ___________________________________________________
______________________________________________________________________________
вакцины лечебные .
.
.
.
вакцины комбинированные:
АКДС _______________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
Тетракокк_____________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
анатоксины __________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
.
б) диагностические препараты
диагностикум бактериальный .
.
.
.
Диагноз подтверждают при титре антител , или при нарастании титра антител в динамике болезни.
диагностикум эритроцитарный .
.
.
.
диагностикум вирусный .
.
.
Диагноз подтверждается при нарастании титра антител в динамике болезни в _______ и более раз
диагностикум риккетсиозный .
.
.
.
антиген Вассермана .
.
.
.
антиген Кана, Закс-Витебского .
.
.
.
биопрепараты, содержащие антитела:
а) лечебно-профилактические биопрепараты, содержащие антитела :
антитоксическая сыворотка .
.
.
.
-глобулины .
.
.
.
б) диагностические препараты
Агглютинирующая неадсорбированная сыворотка – .
.
.
.
Агглютинирующая адсорбированная сыворотка – .
.
.
.
Люминесцирующая сыворотка – .
.
.
.
Люминесцентные антитела против глобулинов– .
.
.
.
Антитоксическая диагностическая сыворотка – .
.
.
.
Вирусная диагностическая сыворотка – .
.
.
.
Гемолитическая сыворотка – .
.
.
.
биопрепараты, не содержащие ни антигены, ни антитела:
Аллергены – .
.
.
.
.
Токсины – .
.
.
.
.
Токсин Шика - .
Токсин Дика - .
Бактериофаги – .
.
.
.
.
Комплимент .
.
.
Интерферон __________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
4) биопрепараты, применяемые для коррекции дисбиотических состояний
Пробиотики – .
.
монопрепараты- .
.
полипрепараты- .
.
комбинированные - .
.
Пребиотики – .
.
.
.
.
Достарыңызбен бөлісу: |