I этап
II этап
III этап
Электрофорез
Перенос белков
биологического
с полиакриламидного геля
материала,
на нитроцеллюлозные
способствующий
полоски и обработка
распределению
их меченными ферментом
белков
антителами,
в полиакриламидном
специфичными к искомому
геле в соответствии
антигену, или меченными
с их электро-
антителами
форетической
к иммуноглобулинам
П О Д В И Ж Н О С ТЬ Ю
человека с последующей
обработкой
хромогеном (ИФА)
Рис. 6.17. Этапы выполнения и результат иммуноблоттинга
электрофоретической подвижностью. В связи с этим на первом этапе исследования
биологический материал от больного подвергают электрофорезу в геле, в резуль
тате каждый вирусный белок «продвигается» в геле на разное расстояние. Затем
с геля делается «нитроцеллюлозный слепок», который обрабатывается иммуно-
ферметным методом с помощью меченных ферментом моноклональных антитед
к каждому вирусному белку. В результате получают нитроцеллюлозную полоску,
на которой, как показано на рисунке, образуются цветовые фрагменты, при этом
каждому вирусному белку соответствует свое расстояние от начала полоски.
Ориентируясь на наличие и ширину каждого цветного фрагмента, получают
представление не только о наличии в организме, например, ВИЧ, но и том,
сколько каждого вирусного белка или антител к нему циркулирует в организме.
Так, например, высокое содержание белка каписида ВИЧ (р24) свидетельствует
об активном прогрессировании вирусного процесса в стадию первичных
проявлений, а динамика антител к р24 и другому поверхностному белку ВИЧ
gpl20 позволяет прогнозировать развитие СПИД или переход в терминальную
стадию инфекционного процесса.
ЛИТЕРАТУРА
1. Лабораторная диагностика опасных инфекционных заболеваний / Под ред.
Достарыңызбен бөлісу: |
