С. В. Кожанова Жалпы иммунология
ЛИМФОЦИТТЕРДІҢ САНЫН АНЫҚТАУҒА
жүктеу/скачать 19,87 Mb. Pdf көрінісі
|
Жалпы иммунология оқулық
| ЛИМФОЦИТТЕРДІҢ САНЫН АНЫҚТАУҒА
АРНАЛҒАН ҚАЗІРГІ ӘДІСТЕР Қазіргі уакытта кандағы лейкоциттердін әр түрлі популяциясын және субпопуляциясын ажырататын иммунды флуоресценттік серпіліс немесе иммунды флуоресценттік әдіс колданьыады. Иммунофлуоресценттік әдісі арнайы беткейлік антигендерді (СО-антигендер — ағылш. СІаМегз о / сіі^егепііапоп) экспрессиялай- тын, сондықтан әр түрлі флуоресценттік бояғыштармен белгіленген моноклонды антиденелер аркылы әр түрлі жасушалар популяциясын анықтауға мүмкіншілік береді. Бүл әдістің принципі жасушалар бетіндегі (көп жағдайда — лимфо- циттер бетінде) дифференциялаушы маркерлік антигендерді аныктауға арналған. Беткері маркерлерді аныктау үшін жасушалар суспензиясына жасушалардың СО-антигендеріне карсы жасьш түсті флуоресценция беретін ФИТЦ-ты (флуоресцеин-изотиоцианат), не кызыл түсті флу- оресценция беретін ТРИЦ-пен (тетраметилромадин-изотиоцианат) не фикоэритринмен, белгіленген моноклонды антиденелерді колданады. Боялған жасушаларды ағымды цитофлуориметрде неме- се флуоресценттік микроскоп аркылы талдайды. Ағымды цитофлуо- риметрия аркьшы жасушалар жиынтығы сәулелік люминесценция- 2 3 -Т а р а у . И м м у н д ы қ д и а г н о с т и к а п р и н ц и п т е р і м е н ә д іс т е р і 519 ны коздыратын жінішке капиллярдан өтеді. Әр жаркыраған жасуша- ны детектор импульс ретінде аныктайды. Прибор автоматты түрінде акпаратты өндіріп, нәтижесін жасушалардын жаркырау каныктығы аркылы гистограмма түрінде көрсетеді (23.3-сурет, түрлі түсті жапсыр- маны караныз). Флуоресценттік микроскоп аркылы көру үшін жасушалар суспен- зиясын шишаға орналастырады, кептіреді, иммерсиялык май кұяды және препаратты х90 объективімен көреді. Зерттеуді каранғыланған бөлмеде өткізу керек. Иммунофлуоресценттік әдістер сонымен катар аутоиммунды ауру- лары бар наукастардың сарысуында тіндік немесе жасушалык антиген- дерге карсы аутоантиденелерді аныктау үшін қолданылады. Моноклонды антиденелердін кен жиынтығын пайдаланып, канда Т- (СӘ2+, СӘЗ+) мен В-лимфоциттерді ғана емес (С019+, СЭ20+, С022+, СӘ72+), сонымен катар Т-лимфоциттер субпопуляцияларын: Т-хелперлер (СӘ4+), цитотоксикалык Т-лимфоцитотер (СӘ8+) мен МК-жасушалар (С 016+, СӘ56+) аныктауға болады. Одан баска, бұл әдіспен туа біткен және адаптивті иммунитет жасушаларының бетіндегі цитокиндерге, тағы баска медиаторларға ре- цепторларын және жасушалардағы белсендіруші маркерлер экспресси- ясы мен жасушалық адгезия молекулаларын аныктауға болады. Кейбір аталған жасушалар мен кұрылымдарды аныктайтын МКАД жинағы 23.5-кестеде берілген. 23.5-кесте. МКАД және олар аныктайтын жасушалар мен кұрылымдар Антиген Анықталатын жасушалар жүктеу/скачать 19,87 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|