Оценку функциональной активности иммунной системы обычно проводят при ауто- иммунных заболеваниях, состояниях иммунодефицита. По рекомендации экспертов ВОЗ предложен двухэтапный подход к оценке иммунного статуса здоровых и больных людей:
этап – обнаружение грубых дефектов фагоцитоза, клеточного и гуморального им- мунитетов. Для этого используются следующие тесты: определение абсолютного и отно- сительного числа лимфоцитов в периферической крови и изучение их морфологии; опре- деление количества Т- и В-лимфоцитов; определение уровней Ig G, Ig A, Ig M, Ig E, Ig D; определение фагоцитарной активности лейкоцитов.
этап – более детальный анализ состояния иммунной системы. Тесты II уровня включают анализ поверхностных маркеров лимфоцитов с использованием моноклональ- ных антител; гистохимический анализ лимфоидных органов; анализ цитотоксичности и пролиферативного ответа лимфоцитов на действие основных митогенов.
Иммуногематологические (иммунохимические) методы исследования
Эти методы используются для диагностики разнообразных иммунных реакций орга- низма. К ним относятся методы, которые основаны на взаимодействии антигена и антите- ла. Они в основном используются для диагностики иммуноглобулинопатий.
В современной клинической иммунохимической лаборатории используются разно- образные модификации электрофоретических и иммунопреципитационных методов.
Электрофоретические методы. К ним относится электрофорез в геле с анализом электрофореграммы и денситограммы. Качественно выполненный электрофорез является высокоинформативным методом, позволяющим получить предваритель- ную характеристику белков сыворотки и других биологических жидкостей при исследовании неспецифической гуморальной защиты. В 90-х годах получил рас- пространение другой вариант электрофореза – капиллярный. В этом варианте фракционирование белков проводится в жидкой буферной среде, заключенной в силиконовый капилляр.
Для количественного определения иммуноглобулинов, специфических антител и циркулирующих иммунных комплексов используются методы, основанные на ре- акции преципитации, которые могут протекать как в жидкой фазе (нефелометри- ческий и турбодиметрический анализ), так и в агаровом геле (радиальная имму- нодиффузия). Для количественного определения Ig E в сыворотке крови в низких концентрациях, определения опухолевых, вирусных, бактериальных и прочих ан- тигенов применяют более точные методы радиоиммунного и иммуноферментного анализа.
Самым распространенным методом определения аутоантител к различным клет- кам в сыворотке крови (к эритроцитам, иммуноглобулинам, митохондриям, анти- тел к ДНК) является метод прямой и непрямой иммунофлюоресценции.
Современные ãèñòîõèìè÷åñêèå ìåòîäû исследования основаны на выявлении осо- бенностей метаболических процессов, специфичных для каждого типа клеток.
Диагностическое значение имеет îïðåäåëåíèå ïåðîêñèäàç в нейтрофилах при мие- лопролиферативных заболеваниях, остром миелобластном лейкозе; щелочной фосфатазы при хроническом миелолейкозе, серповидноклеточной анемии, энзимопатиях; эстеразы в бластных клетках при миеломонобластном лейкозе.
С середины ХХ века возникла новая дисциплина – ìîëåêóëÿðíàÿ áèîëîãèÿ, которая изменила представления о механизмах функционирования биологических систем вообще и кроветворной системы в частности. Разработан метод исследования различных участков ДНК (метод рестрикции).
Достарыңызбен бөлісу: |