Скарификацоинные кожные тесты с пищевыми аллергенами
относят к тра
диционным иммунологическим тестам, помогающим подтверждать подозрева
емую пищевую аллергию и выявлять конкретный пищевой аллерген. Методика
проведения теста проста: на коже передней поверхности предплечья скарифи
катором наносятся линейные или точечные поверхностные насечки, поверх ко
торых фиксируется жидкий экстракт конкретного пищевого продукта. Проба
оценивается как положительная при возникновении в зоне скарификации зудя
щего покраснения. К сожалению, диагностическая значимость данного метода
недостаточно высока: чувствительность — не более 65%, специфичность — около
50% [Ройт А. и др., 2000]. Практика показала, что больные не дают кожную ал
лергическую реакцию на заведомый пищевой аллерген, в то время как немало
791
792
Ãëàâà 36
больных с ложноположительными реакциями при проведении скарификаци
онных аллергологических тестов.
Клеточные тесты с пищевыми аллергенами
(базофильный тест Шелли,
лейкоцитопенический и тромбоцитопенический провокационные тесты и др.)
многие авторы использовали в клинике исключительно для повышения диаг
ностических возможностей других исследований, в первую очередь таких как
элиминационные и провокационные тесты. Диагностическая информатив
ность данных методов исследования относительно невелика, поэтому в насто
ящее время они имеют лишь историческое значение. Следует отметить метод
диагностики пищевой непереносимости, названный авторами «Гемокод» (цит.
по: Семенова Н. В., Медведев С. Н., Решетова Н. В. Медицинская кафедра.—
2002.— № 4.— С. 16–17).
«Гемокод» разработан в НИИ биомедицинской химии им. В. И. Ореховича
РАМН, и, по мнению авторов, позволяет выявлять гиперчувствительность орга
низма, в основе которой могут лежать различные механизмы аллергической и
псевдоаллергической, природы. Обоснование метода следующее. На конечном
этапе пищевой непереносимости различных типов наблюдается высвобожде
ние гистамина не только тучными клетками слизистых оболочек желудочно
кишечного тракта, но и многими клеточными элементами крови, особенно фаго
цитами. Гистаминовый «залп» в определенной степени обусловливает большин
ство клинических проявлений пищевой непереносимости. Воздействие на
фагоцитирующую клетку неспецифического раздражителя приводит к запуску
дыхательной вспышки, которая сопровождается генерацией активных форм
кислорода и, соответственно вспышкой хемолюминесценции (ХЛ). Обнаруже
ние этого эффекта посредством оценки ХЛ цельной крови в присутствии пище
вого аллергена было положено авторами в основу диагностики данной патоло
гии.
Клинические исследования диагностической значимости «Гемокода» по
казали неудовлетворительные результаты.
Можно сделать заключение: метод диагностики пищевой аллергии «Гемо
код» не готов к использованию в клинической практике и требует дальнейшего
изучения.
Серологические исследования
в настоящее время все шире используются для
диагностики как истинной пищевой аллергии, связанной с IgEзависимыми ме
ханизмами гиперчувствительности немедленного типа, так и для выявления IgE
независимых форм пищевой аллергии, то есть замедленной аллергии. Прово
дят качественный и количественный анализ суммарных и специфических IgE и
IgG сыворотки крови.
Среди предложений по диагностике IgGопосредованной пищевой непе
реносимости уже давно есть многочисленные более или менее современные
тесты, производимые под разными наименованиями. Все они основаны на ме
тодике определения «цитотоксичности». Авторы считают непереносимость ре
792
Ïèùåâàÿ íåïåðåíîñèìîñòü
793
акцией гиперчувствительности II типа (цитотоксической реакцией) и пыта
ются под микроскопом идентифицировать комплексы «антиген—антитело+
лейкоциты».
Очевидно, что такое толкование результатов является в значительной
степени эмпирическим и в любом случае зависит от диагноста. Помимо этого,
с патофизиологических позиций для проявления цитотоксического действия
требуется прочная ковалентная связь антигена с какойлибо тканью. Для ме
таболизма антигена нужно время, в крови такие процессы не происходят. Бо
лее того, при цитотоксических реакциях в комплекс включаются не нейтрофи
лы, а цитотоксические лимфоциты (Ткиллеры) и макрофаги. Возможность
использования морфологических изменений лейкоцитов как косвенного ука
зания на цитотоксичность пищевого продукта для других популяций клеток
(тканевых клетокмишеней) не имеет подтверждения.
В ряду иммунологических методов оценки неспецифических параметров
иммунного статуса при большинстве атопических заболеваний, к которым от
носится и истинная пищевая аллергия, наибольшее значение имеет определе
ние количества общего IgE. Существуют различные методы определения ко
личества общего IgE. Чаще всего используют иммуноферментный анализ
(ИФА).
Для скринингового определения пищевых IgG в большинстве стран мира
наибольшее распространение получил метод ELISA (enzyme linked immuno
sorbent assay — ферментный иммуносорбентный анализ), определяющий цирку
лирующие антитела, распознающие очищенные пищевые антигены и фиксирую
щиеся к ним.
Измерение индивидуальных уровней пищевых антител пациента зависит
от их способности специфически связываться с пищевым аллергеном (рис. 36.1.).
После того, как антитело свяжется с антигеном, диагностические полистироло
вые плашки промываются для удаления других несвязанных антител и компо
нентов крови. Затем пищевые антитела определяют с помощью вторых анти
тел, которые химически связаны с ферментом. Фермент в конце процесса вызы
вает окрашивание. Полученная интенсивность окрашивания является точным
индикатором исходной концентрации антител против пищевых антигенов в
образце крови пациента.
Количество тестируемых антител определяется по содержанию окрашен
ного продукта реакции путем сканирования оптической плотности в сравнении
с результатами пациента, что позволяет лаборатории точно устанавливать ко
личество антител к каждому пищевому продукту. Затем лаборатория интерпре
тирует результаты, на основании которых относит каждый продукт к катего
рии «нет реакции», «ограничить (или «чередовать»), исключить. Положитель
ный контрольный образец всегда включают в каждый тест для подтверждения
того, что тестовая система работает правильно.
793
794
Ãëàâà 36
Рис. 36.1. Схематическое изображение ферментного иммуносорбентного анализа
(ELISA) для определения пищевых IgG (Е – энзимы).
Метод ELISA для решения диагностических задач пищевой аллергии был
разработан в Великобритании в лаборатории питания Йоркского универси
тета, назван «Йорктест», запатентован (в том числе и в России), прошел кли
нические испытания в ряде стран Западной Европы и предложен для широко
го клинического использования. В этом тесте применяется специальный на
бор для забора крови из пальца самим пациентом, позволяющий
иммунологической лаборатории всего по 2–3 каплям крови точно определить
индивидуальные уровни IgG, образующиеся у пациента на конкретный пище
вой продукт.
Собственный клинический опыт использования диагностического набо
ра «Йорктест» для диагностики пищевой аллергии и анализ западноевропей
ской специальной литературы (отчеты о проведении рандомизированных двой
ных слепых исследований роли пищевой аллергии при синдроме раздражен
ного кишечника, при мигрени, выполненных в Великобритании)
свидетельствуют о следующих показателях диагностической значимости ме
тода: чувствительность — 92–95%; специфичность — 86–89%; воспроизводи
мость — 95–97%. Они существенно превосходят аналогичные клинические кри
терии всех известных методов выявления пищевой непереносимости.
Интерпретация результатов «Йорктеста» проста. Реакции пищевой не
переносимости в данном тесте разделяют на три категории, в зависимости от
количества выявленных специфических антител к конкретному продукту пи
Пищевой аллерген
Антитела к пищевому аллергену
Вторые антитела (человеческие IgG),
меченные ферментом
Окрашивание различной
интенсивности
794
Ïèùåâàÿ íåïåðåíîñèìîñòü
795
тания. Следование рекомендованному чередованию или исключению опреде
ленных продуктов из диеты является ключом к клиническому успеху. Сформу
лированные по результатам «Йорктеста» рекомендации не пожизненны, и
аккуратное (постепенное и в медленно возрастающих количествах) потребле
ние отдельных продуктов возможно. В отличие от IgEзависимой (немедлен
ной) аллергии, в случае IgGзависимой (замедленной) пищевой аллергии при
ходится иметь дело более чем с одним продуктом. Обычно в среднем пациенты
с рассматриваемой формой пищевой аллергии реагируют на 4–5 и более раз
личных внешне вполне безопасных продуктов.
Продукты (по результатам иммунологического тестирования), относящи
еся к категории
Достарыңызбен бөлісу: |