1.
Стандартный
цитогенетический
анализ
– метод, при
котором исследуются хромосомы делящейся (митотической)
клетки на этапе метафазы. Метод позволяет определять грубые
хромосомные аномалии в клетке, в данном случае – опухоле-
вого субстрата. Клетки, число
хромосом в которых увеличено,
называют гипердиплоидными; клетки с уменьшенным количе-
ством хромосом – гиподиплоидными. Структурные изменения
хромосом включают транслокации (перенос хромосомного
участка), делеции (утрата хромосомного материала) или
инверсии (поворот сегмента в пределах одной хромосомы
на 180
о
).
2.
Молекулярно
-
генетическое
исследование
методом
ка
-
чественной
или
количественной
полимеразной
цепной
реакции
(
ПЦР
).
Методика проводится при многократном и специфиче-
ском копировании определенных
участков ДНК с помощью
фермента ДНК-полимеразы. Метод позволяет определить не
только химерные гены, образующиеся
при слиянии участков
нормальных генов, но и синтезируемые ими белки. С помощью
ПЦР в реальном времени можно контролировать МОБ, так как
метод очень чувствителен, позволяет определять клетки с ано-
малиями, даже если их количество не превышает 1/10
6
.
3.
Флюоресцентная
in situ
гибридизация
(
fluorescence
in situ
hybridization
–
FISH) – очень точный метод, при котором
полнохромосомными ДНК-зондами молекула ДНК опухоле-
вой клетки метится для изучения определенных участков. FISH
позволяет нацелить зонд на ранее выявленную аномалию,
подтвердить ее присутствие или опровергнуть.
Недостатком
метода является невозможность выявления всех специфиче-
ских изменений кариотипа опухолевой клетки.
4.
Метод
секвенирования
нового
поколения
(англ. next
generation sequencing – NGS). Использование данного метода
продиктовано накопленными знаниями о специфических изме-
нениях кариотипа опухолевых клеток. Изучение катамнеза па-
циентов с лейкозами показало,
что часть из выявленных
мутаций обеспечивает пациенту благоприятный долгосрочный
220
прогноз и не требует ужесточения режимов полихимиотерапии
(ПХТ), обнаружение других мутаций делает необходимым
проведение ее интенсивных высокодозных режимов с последу-
ющим применением клеточных технологий, таких как транс-
плантация гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК). В
настоящее время генетические методы необходимы для прове-
дения оценки функции трансплантата после ТГСК при онколо-
гических заболеваниях у детей с использованием генетических
методик определения общего и линейного химеризма на раз-
личных сроках.
Достарыңызбен бөлісу: