Предварительная обработка культуральной жидкости (3-я стадия)
В зависимости от того, где антибиотическое вещество сосредоточено, применяют соответствующие методы его извлечения. Если антибиотик находится в культуральной жидкости, его выделяют методами экстракции растворителями, не смешивающимися с жидкой фазой, или осаждают в виде нерастворимого соединения, или сорбируют ионообменными смолами. Выделение антибиотика из клеток микроорганизмов осуществляют с помощью экстракции органическими растворителями. Если антибиотик содержится в культуральной жидкости и в клетках продуцента, первичной операцией его выделения является перевод антибиотика в фазу: сначала переводят в осадок, а затем экстрагируют. Отделение нативного раствора от биомассы и взвешенных частиц проводят методами фильтрации или центрифугирования.
Выделение и очистка антибиотика (4-я стадия)
В процессе образования антибиотика в культуральную жидкость (наряду с присутствием в ней различных неиспользованных компонентов среды) выделяются и разнообразные продукты обмена, она обогащается продуктами автолиза клеток. Удаление примесей – первая и весьма важная стадия химической очистки антибиотика.
Цель химической очистки – извлечение антибиотика из нативной жидкости или из клеток продуцента, концентрация и освобождение его от сопутствующих примесей и, в конечном счете, получение высоко очищенного препарата, пригодного для соответствующего применения. В качестве основных методов используют экстракцию, осаждение, сорбцию на ионообменных материалах, упаривание, сушку.
Метод экстракции. Нередко в целях очистки антибиотика от различных примесей его многократно переводят из одного растворителя в другой с предварительным осаждением – перекристаллизацией.
Ионообменная сорбция. Метод состоит в том, что при пропускании водных растворов антибиотиков, являющихся по химической природе кислотами, основаниями или амфотерными соединениями, через колонки с соответствующими ионообменными смолами они сорбируются на них, а раствор с частью примесей, имеющих противоположный антибиотику заряд, проходит через колонку.
Достарыңызбен бөлісу: |
