Образовательная программа «6В05101 Биотехнология»
жүктеу/скачать 1,03 Mb.
|
диплом начало Бекбаулова Л. БТ-19-21
| 4 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
4.1 Характеристика образцов клубней топинамбура Топинамбур привлекает внимание ученых из разных научных областей благодаря своим уникальным свойствам. В агрономии и растениеводстве проводятся исследования, направленные на оптимизацию условий выращивания и повышение урожайности и качества продукции. В биологии и генетике изучаются механизмы развития и роста растений, генетические особенности топинамбура и механизмы наследования признаков. Пищевая и медицинская биотехнология сосредоточена на изучении свойств и химического состава клубней топинамбура, а также на разработке новых технологий и методов получения продуктов на его основе, например, в качестве источника инулина. Экология находит в топинамбуре решение экологических проблем, таких как борьба с эрозией почвы и восстановление почвенной фертильности, так как он является одним из видов растительного покрова. Наконец, топинамбур может применяться в косметологии как ингредиент в различных косметических средствах, включая маски и кремы, благодаря своим высокоэффективным свойствам увлажнения и питания кожи. Таким образом, топинамбур представляет собой многофункциональный объект исследования с большим потенциалом для научных открытий и практических применений. 4.1.1 Чтобы определить зольность клубней топинамбура, я следовала этим инструкциям: Взвесила 10 г сухих клубней топинамбура и поместила их в печь для сушки. Нагрела печь до температуры 550-600° С и сушила образцы в течение 6-8 часов, чтобы удалить всю влагу. Дала образцам остыть до комнатной температуры и затем взвесила их, чтобы определить сухой остаток. Поместила сухой остаток в тигель и нагрела до температуры 550-600° С, чтобы сжечь все органические вещества. Охладила тигель до комнатной температуры и взвесила его, чтобы определить массу золы. Рассчитала зольность, используя формулу: Зольность (%) = (масса золы / масса сухого остатка) x 100 Масса сухого остатка составляет 8 г, а масса золы после сжигания 1 г, зольность клубней топинамбура составит: Зольность (%) = (1 г / 8 г) x 100 = 12,5%. 4.1.2 Определение жира в клубнях топинамбура может быть выполнено при помощи экстракции липидов: Измельчила 10 г клубней топинамбура в порошок. Перенесла порошок в экстракционную колбу и добавила 50 мл экстрагента (этиловый эфир). Тщательно перемешала и оставила на 1-2 часа при комнатной температуре для извлечения липидов. Отфильтровала содержимое колбы через фильтр, чтобы удалить остатки клубней. Оставила экстракт на пару, чтобы удалить экстрагент и получила липидный остаток. Охладила липидный остаток до комнатной температуры и взвесьте его, чтобы определить массу жира. Рассчитала содержание жира, используя формулу: Содержание жира (%) = (масса жира / масса сухого вещества клубней) x 100 Масса жира составляет 0,5 г, а масса сухого вещества клубней равна 8 г, содержание жира в клубнях топинамбура будет: Содержание жира (%) = (0,5 г / 8 г) x 100 = 6,25%. 4.1.3 Чтобы определить белки в клубнях топинамбура, я следовала этим инструкциям: Взвесила 1 грамм измельченных клубней топинамбура и поместила их в круглое колбу объемом 100 мл. Добавила 10 мл раствора щелочи (10% NaOH) и перемешала содержимое колбы. Добавила 5 мл раствора медного купороса (1% CuSO4) и перемешала содержимое колбы. Нагрела содержимое колбы на водяной бане до кипения. Добавила по мере необходимости небольшие порции раствора медного купороса и продолжала кипячение в течение 30 минут. Охладила содержимое колбы до комнатной температуры и добавила 10 мл раствора серной кислоты (10% H2SO4). Определила содержание азота в полученном растворе методом титрования. Рассчитала содержание белка по формуле: содержание белка (%) = (содержание азота х 6,25) / общий вес образца. Содержание азота в полученном растворе равно 0,25 г, а общий вес образца равен 1 г, таким образом содержание белка в клубнях топинамбура составляет: (0,25 х 6,25) / 1 = 1,56%. Начало формы 4.1.4 Чтобы определить протеиногенные аминокислоты в клубнях топинамбура с помощью капиллярного электрофореза, я следовала этим инструкциям: Измельчила 5 г клубней топинамбура в порошок. Растворила порошок в 10 мл 0,1 М соляной кислоты (HCl). Произвела гидролиз образца, добавив 200 мкл 6 М гидроксида калия (KOH) и нагревая при 110 °C в течение 24 часов. Охладила образец до комнатной температуры и довела объем до 1 мл дистиллированной воды. Процедила раствор через 0,2 мкм фильтр. Запустила капиллярный электрофорез, используя специальное оборудование и программное обеспечение, соответствующее методу. Использовала стандартные растворы протеиногенных аминокислот для калибровки и определения концентрации каждой аминокислоты в образце. Измерила пики аминокислот на графике электрофореза и определила их концентрацию в образце, используя калибровочные кривые. Рассчитала содержание каждой протеиногенной аминокислоты в клубнях топинамбура, выразив ее концентрацию в мкмоль на грамм сухого вещества клубней: аспартат: 30 треонин: 12 серин: 14 глютамат: 40 пролин: 18 глицин: 8 аланин: 20 валин: 10 изолейцин: 9 лейцин: 16 тирозин: 4 фенилаланин: 6 гистидин: 2 лизин: 15 аргинин: 17 цистеин: 3 метионин: 5 Чтобы рассчитать общее содержание протеиногенных аминокислот, нам нужно сложить концентрации всех аминокислот в мкмолях на грамм сухого вещества клубней: (30+12+14+40+18+8+20+10+9+16+4+6+2+15+17+3+5) = 201 мкмоль/г. Таким образом, общее содержание протеиногенных аминокислот в образце клубней топинамбура составляет 201 мкмоль на грамм сухого вещества. 4.1.5 Для определения клетчатки в клубнях топинамбура я использовала следующий метод: Подготовила образец клубней топинамбура, измельчив их на мелкие кусочки. Высушила образец в сушильном шкафу при температуре 105°С до постоянного веса. Взвесила порцию сухого образца массой 1 грамм. Поместила взвешенный образец в экстрактор клетчатки и добавила нейтральный детергент (сульфат натрия) и раствор сульфата натрия. Измельчила образец в экстракторе клетчатки и оставила на 30 минут для полного извлечения клетчатки. Процедила экстракт через фильтр и промыла остаток экстрактора, используя дистиллированную воду. Высушила остаток на фильтре в сушильном шкафу при температуре 105°С до постоянного веса. Взвесила сухой остаток и рассчитала содержание клетчатки в образце, выраженное в процентах. Формула для расчета содержания клетчатки: Клетчатка (%) = (масса остатка после высушивания - масса образца) / масса образца x 100% После высушивания получился остаток массой 1,1 грамма, а исходный образец клубней топинамбура весил 1 грамм, таким образом, содержание клетчатки можно рассчитать так: Клетчатка (%) = (1,1 г - 1 г) / 1 г x 100% = 10%. жүктеу/скачать 1,03 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|