Таблица 2 - Определение числа микробных клеток Разведение препарата
10
-7
10
-6
Количество посеянной суспензии
Число колоний на одной чашке (1-ой)
Число колоний на одной чашке (2-ой)
0,1 мл
45
56
0,1 мл
510
588
Расчет: среднее число колоний на чашке составляет
510+588/2 = 549 в разведении 10
-6
и 45+56 /2 = 55,5 в разведении 10
-7
Количество живых бактерий в 1 мл равно:
549 10
6
+ 55 5 10
7
/ 2 Ч 10 = 5520000000=5,5 млрд
6.5 Определение типичности роста колоний
Колонии должны быть мелкие, выпуклые, белого цвета.
6.6 Определение бактерийной чистоты
6.6.1 Аппаратура и материалы по 6.4.1
6.6.2 Проведение испытания
Определение бактерийной чистоты препарата проводят в соответствии с ГОСТ 28085
со следующими дополнениями: для определения бактерий группы кишечной палочки
используют жидкую среду Кесслера. Содержимое каждого пакета растворяют стерильным
физиологическим раствором из расчета 10 мл на одну дозу. Гранулы помещают в стерильные
пробирки (флаконы) и добавляют стерильный физиологический раствор из расчета 10 мл на
1 г препарата. Из восстановленной взвеси готовят следующее разведение 1:10. Образцы
препарата в разведении 10
-1
, в количестве 10 смі переносят в колбочки с 40-50 смі
стерильной жидкой среды Кесслера. Посевы термостатируют при (38±1) єС в течение 18-24
часов. .Наличие бактерий группы кишечной палочки определяют по газообразованию. При
отсутствии газообразования препарат считает не загрязненным бактериями группы
кишечной палочки.
По 1 смі образца разведений препарата 10
-2
и 10
-3
, переносят в чашки Петри с мясо-
пептонным агаром, взяв по две чашки на каждое разведение. Стерильным шпателем
тщательно растирают препарат по поверхности агара, оставляют на 2-3 часа для впитывания,
переворачивают чашки вверх дном и помещают в термостат при температуре 37±1°С на 48±2
часа, затем подсчитывают количество выросших колоний.
Пример расчета:
Делают подсчет колоний в 2-х чашках Петри по разведениям. Если количество
колоний в двух чашках составляет 10+20=30 в разведении 10
-1
и 1+2=3 в разведении 10
-2
, то
число микробов в одной таблетке равно:
(10+20) · 10 + (1+2) · 10
2
/ 2 = 300
(сумма колоний в двух чашках умножается на число десятикратных разведений).
Наличие колоний патогенной микрофлоры не допускается. Допускается наличие
сапрофитной микрофлоры не более 300 колоний на 1 г.